1

HỘI THẢO KHOA HỌC

CÁC NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CƠ BẢN &
NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG TRONG HÓA HỌC

THÀNH PHẦN HÓA HỌC

VÀ DƯỢC TÍNH CỦA CHI HEDYOTIS
Phạm Nguyễn Kim Tuyến

Đồng Nai,
Hà Nội 20/05/2016
– 11/09/2015
 CHI HEDYOTIS
CHI SONNERATIA,
AVICENNIA

H. auricularia H. merguensis
PARMOTREMA
S. alba J. E. Smith
H. biflora H. linleyana
PSEUDERANTHEMUM

H. nigricans H. pressa S. ovata Backer P. praesorediosum

.

H. pinifolia H. dichotoma P. carruthersii.

A. lanata non Ridley P. tinctorum
H. microcephala H. vestita

H. symplociformis H. uncinella
A. officinalis L. P.grayanum
 MỤC LỤC
TỔNG QUAN VỀ CHI HEDYOTIS

PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

KẾT QUẢ & THẢO LUẬN

KẾT LUẬN & KIẾN NGHỊ

 DƯỢC TÍNH
TỔNG QUAN
CHI HEDYOTIS
THÀNH PHẦN HÓA HỌC
 DƯỢC TÍNH CHI HEDYOTIS
Thanh nhiệt, giải độc, làm dịu cơn đau[1,2].
Trị rắn cắn, sốt, hen suyễn, kháng viêm, u bướu, viêm
H. corymbosa
ruột thừa, viêm gan và ung thư phổi[2,3].

H. capitellata

H. diffusa
[1] Phạm Hoàng Hộ (2006), Cây có vị thuốc ở Việt Nam, NXB Trẻ, 512-515.
[2] Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam – trồng hái, chế biến và trị bệnh ban đầu, NXB Nông Nghiệp Hà Nội, 2236-2238.
[3] Võ Văn Chi, Từ điển thực vật thông dụng, NXB KHKT Hà nội, 2003.
1
 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CHI HEDYOTIS
STEROID

Stigmasterol b-Sitosterol γ-Sitosterol

TRITERPENOID

Ursolic acid Oleanolic acid Olean-12-en-3β,28,29-triol

[4] Bhakuni D.S. (1959), J. Sci. Ind. Res., 18, pp. 445-446 (CA., 54, 12618h).
[5] Yung-Husan C., Fang-Rong C., Chin-Chung W., Yang-Chang W. (2006), Planta Med., 72, pp. 75-78. 2
 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CHI HEDYOTIS
ANTHRAQUINONE

Alizarin-1-methyl ether 1,2,3-Trimethoxyanthraquinone 2,3-Dimethoxy-

6-methylanthraquinone
FLAVONE

3’,4’,5,6,7-Pentamethoxy- 3’,4’,5,5’,6,7-Hexamethoxy- 3’,4’,5,5’,6,7,8-Heptamethoxy-

flavone flavone flavone
[6] Youngleem K., Eun j.p., jinwoong k., Yang-bae k., So r.k., Young c.k., j. nat. prod., 64, 75-78, 2001.
[7] Laïi Kim Dung, Traàn Vaên Sung, Phaïm Gia Ñieàn (2002), Taïp chí Hoùa hoïc, 3, tr. 66-68.
[8] Nishihama Y., Matsuda K., Yamaki M., Takagi S., Sakina K. (1981), Planta. Med., 43, pp. 28-33. 3
 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CHI HEDYOTIS
FLAVONOL

5,7,4’-Trihydroxyoxyflavanone 5,7,3’,4’-Tetrahydroxyflavone 3,5,7,3’,4’-Pentahydroxyflavone

(Naringenin) (Luteolin) (Quercetin)

IRIDOID

Asperulosidic acid Deacetylasperulosidic Deacetylasperulosidic

ethyl ester methyl ester
[9] Ho T-I., Chen G-P., Lin Y-C., Lin Y-M., Chen F-C. (1986), Phytochemistry, 25, pp. 1988-1989.
[10] Hui W.H., Lam C.N. (1964), Aust. J. Chem., 17, 493-495. 4
 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CHI HEDYOTIS
QUINONE

CUMARINE

Hedyotiscone A Hedyotiscone B Hedyotiscone C

[11] Ahmad R., Shaari K., Lajis N. H., Hamzah A.S., Ismail N. H., Kitajima M. (2005), Phytochemistry, 66, pp. 1141-1147.
[12] Phuong N.M., Sung T.V., Schmidt J., Porzel A., Adam G. (1999), Planta Med., 65, pp. 761-762.
[13] Phuong N.M., Sung T.V., Schmidt J., Porzel A., Adam G. (1999), Phytochemistry, 52, pp. 1725- 1729.
5
 QUY TRÌNH NGHIÊN CỨU
THỰC
NGHIỆM
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
 QUY TRÌNH NGHIÊN CỨU
1 Nguyên liệu

2 Quy trình ly trích

3 Xác định cấu trúc hóa học

4 Thử nghiệm hoạt tính sinh học

5 Xác định hợp chất tiềm năng

-Xây dựng quy trình định lượng

6 -Bán tổng hợp

7 NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG

6
CÁC LOÀI HEDYOTIS NGHIÊN CỨU

H. auricularia H. biflora H. nigricans H. dichotoma

H. microcephala H. pinifolia H. uncinella H. symplociformis

H. vestita H. pressa H. linleyana H. merguensis 7

SƠ ĐỒ ĐIỀU CHẾ CAO & CÔ LẬP HỢP CHẤT
Mẫu cây tươi
- Rửa sạch, phơi khô, xay nhuyễn
Bột khô
- Chiết kiệt với etanol
Cao thô etanol
- Chiết lỏng-lỏng

Cao Cao Cao Cao

n-hexane Cloroform ethyl acetate nước

Hợp chất
thiên nhiên 8
PHƯƠNG PHÁP CÔ LẬP

9
PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC

NMR spectrometer HR-ESI-MS spectrometer

BRUKER AVANCE III Or VARIAN MicrOTOF-Q II

Polarimeter Máy đo phổ IR

Melting Point Apparatus
BUCHI B-540
KRUSS BRUKER
10
 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC
KẾT QUẢ
THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH SINH HỌC
 H. nigricans – Hoa kim cương

Stigmasterol (1) β-Sitosterol (2) Oleanolic acid (3)

Ursolic acid (4) β-Amyrin (9) α-Amyrin (10) % Inhibition

Compound
MCF-7 cell
(100 g/mL)
growth
Camptothecin 50.19
Premuletin (11) Chrysin (12) Luteolin (13) Ursolic acid 74.59
Oleanolic Acid 19.16
-Amyrin 98.23
β-Amyrin 28.21
Biochanin A (14) Arbutin (15)
(H=1%)
Arbutin 1.33
Isoflavone: a new skeleton Luteolin 23.63
In Hedyotis genus Chrysin 19.69
Biochanin A 73.37
[14] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Chemistry, 48(5), 546-550, 2010.
[15] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Science and Technology, 46(A), 237-243, 2008.
Primuletin 20.39 11
 H. auricularia – An điền tai %
Compound Inhibition
(100 g/mL) MCF-7 cell
growth
(16) 67.36
(17) 48.51
Stigmasterol (1) β-Sitosterol (2) Oleanolic acid (3) Ursolic acid (4)
(18) 36.43

3,7,2’,4’-Tetramethoxy
11-Oxoursolic acid (16) -5-hydroxyflavone (17) Quinizanin (18)

1'-O-Ethyl-
β-D-galactopyranoside (19)
1'-Desoxy-6'-O-(1-hydroxymethyl-2-hydroxy-
1-methoxy)ethylglucopyranoside (20)

A new
compound
[16] Bhakuni D.S.. Et al., 10, 2247-2249, 1971.
[17] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Chemistry, 45(2), 233-236, 2007.
[18] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Science and Technology, 46(A), 237-243, 2008. 12
 H. biflora – An điền hai hoa

Stigmasterol β-Sitosterol
3-O-β-D-glucopyranoside (21) 3-O-β-D-glucopyranoside (22)

Spergulacin (23)

Ursolic acid (4) Oleanolic acid (3)

Philonotisflavone 7-O-[4""-O-β-D-
galactopyranosyl]-β-D- glucopyranoside (26)
Quercetin (24) Rutin (25)
Hopane & biflavone: new
skeletons in Hedyotis genus
Ethyl 1’-O-β-D-glucopyranoside (28)
(4E,8Z)-1-O-β-D-Glucopyranosyl-2-(2’-
hydroxyhexadecanoylamino)
nonadeca-4,8-diene-3-ol (27)
[16] Bhakuni D.S., J. Sci. Ind. Res., 18, pp. 445-446 , 1959
[19] P. N. K. Tuyen and group, the Sciences and Enginering conferrence Organic Chemistry, Vietnam Nationwids IV, 552-555, 2007.
[20] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Sai Gon University, Hochiminh City, 2, 104-110, 2009. 13
 H. pinifolia – An điền lá thông

4-O-[3-Hydroxy-2-(dihydroxy
Stigmast- Stigmasterol β-Sitosterol methylmethyloxy)]propyl-
3β,5α,6β-triol (29) 3-O-β-D-glucopyranoside (21) 3-O-β-D-glucopyranoside (22) α-L-rhamnopyranose (35)
A new
compound

Ursolic acid (4) Oleanolic acid (3) 2,3b,23-Trihydroxy

olean-12-ene (30)

1,6-Dihydroxy-2-methyl 1,6-Dihydroxy-7-methoxy-
anthraquinone (31) 2-methylanthraquinone (32)

1,3,6-Trihydroxy-2-methyl 3,6-Dihydroxy-2-methyl
anthraquinone (33) anthraquinone (34)
[21] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Chemistry, 49 (6A), 362-368, 2011.
[22] P P. N. K. Tuyen and group, Journal of Science and Technology, 46(A), 244-252, 2008.
14
 H. vestita- An điền áo

Ursolic acid (4) Oleanolic acid (3) 3β,6β,23-Trihydroxyolean- Alphitolic acid (36) (+)-Syringaresinol (42)
12-ene-28-oic acid (37)
Lupane: a new skeleton in
Hedyotis genus

Kaempferol (40) Kaempferol Auricularin (5)

3-O-rutinoside (41)

p-Hydroxy Vomifoliol 9-O-β-D- 6α-Methoxy

benzoic acid (38) glucopyranoside (39) geniposide (43)

[23] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Science and Technology, 49(5B), 450-456, 2011.
[24] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Chemistry, 51(5), 648-652, 2013.
15
 H. dichotoma – An điền lưỡng phân

Ursolic acid (4) Oleanolic acid (3)

(6R,9S)-Roseoside (44) D-(+)-Pinitol (45)

A new Triterpen saponin & noroleane:

compound new skeletons in Hedyotis genus

3-O-[-L-Rhamnopyranosyl-(14)-b-D-glucopyranosyl] -
(13)- -L-arabinopyranosyl]-30-noroleane-12,20(29)-diene-
28-oic acid (46)
[25] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Chemistry, 49(6A), 362-368, 2011.
16
 H. pressa – An điền sát

Ursolic acid (4) Oleanolic acid (3) 23-Hydroxyursolic acid (47)

3b-Hydroxyurs-28(13)-lactone (48) Maslinic acid (49) Asiatic acid (50) Narigenin (51)

Flavanone : a new skeleton

in Hedyotis genus

2-Hydroxymethyl-1-methoxy 2-Hydroxy-1-methoxy
anthraquinone (52) anthraquinone (53)

[26] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Science and Technology, 50(3A), 62-67, 2012.
17
 H. linleyana – An điền linley

Ursolic acid (4) Oleanolic acid (3) 3,3',4'-Tri-O-methyl

ellagic acid (54)

Sodium salt of deacetyl Teneoside D (56) 6β-Hydroxygeniposide (57)

asperulosidic acid (55)

2 New
compounds

Sodium 6-O-methyldeacetyl 1,3,6-Trimethylpyrano[2,3-d]

asperulosidate (58) imidazole-2,5(1H,3H)-dione (59)
[27] P. N. K. Tuyen and group, Journal of Chemistry, 53(2E1), 99-102, 2015.
[28] P. N. K. Tuyen and group, Natural Product Communications, accepted, 2015.
18
 H. merguensis – Răm núi 2 New
compounds

3-O-{[b-D-Glucopyranosyl-(12)] b-D-Xylopyranosyl-(12)-b-D-glucopyranosyl
b-D-Glucopyranosyl -[b-D-glucopyranosyl-(13)] 3-O-[-L-rhamnopyranosyl-(13)
3-O-b-D-glucopyranosyloleanoate (60) -b-D-glucopyranosyl}oleanolic acid (63) -b-D-glucopyranosyl]oleanoate (64)

b-D-Glucopyranosyl 3-O-[-L-rhamnopyranosyl- 3-O-[-L-Rhamnopyranosyl-(13) 3-O-{[-L-Rhamnospyranosyl-(12)-b-D-glucopyranosyl

(13)-b-D-glucopyranosyl]oleanoate (62) -b-D-glucopyranosyl]oleanolic acid (61) -(14)]-[b-D-glucopyranosyl-(12)]
-b-D-glucopyranosyl}oleanolic acid (65)
IC50 (µg/mL)
Compound
KB Hela-S3
Triterpen saponin:
(64) > 100 > 100
a new type of compound in
Hedyotis genus (65) 58.09 97.64
Doxorubicin 0.13 0.06

[29] P. N. K. Tuyen and group, Tạp chí Hóa học, 53(6e1,2), 372-376, 2015.
19
BÁN TỔNG HỢP THIOFLAVONE
Inhibition of
Compound
MCF-7 cell
(100 g/mL)
growth (%)
Camptothecin 50.19
(1) 50.27
(1’) 61.03
(2) 48.51
(2’) 64.89
(3) 56.59
(3’) 69.24
(4) 71.82
(4’) 82.60
(5) 20.04
(5’) 28.39

[30] P. N. K. Tuyen and group, Magnetic Resonance on Chemistry, 47, 1043-1054, 2009. 20
KẾT LUẬN
XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC
&
KIẾN NGHỊ
THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH SINH HỌC
 H. merguensis

H. auricularia
(9 compounds)
KẾT LUẬN (8 compounds)

H. linleyana
(8 compounds)
12 Loài thuộc Hedyotis đã được khảo sát
H. biflora
(10 compounds) 77 Hợp chất đã được cô lập & xác định cấu trúc
H. pressa
(9 compounds)
Ngoại trừ (1)-(4), tất cả các hợp chất còn lại lần đầu tiên
H. nigricans được biết có hiện diện trong các loài Hedyotis khảo sát.
(11 compounds)
6 Hợp chất mới : (20), (35), (46), (58), (59), (62), (65) H. dichotoma
(5 compounds)

H. pinifolia Khung mới phát hiện có trong chi Hedyotis:

(11 compounds)
Isoflavone, flavanone and biflavone
H. vestita
Triterpen hopane, lupane and noroleane (11 compounds)

H. microcephala
Triterpen saponin
(8 compounds)

Hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú MCF-7 H. uncinella

(5 compounds)
10 Hợp chất (4), (9), (14), (16), (1), (1’), (3), (3’), (4), (4’)
Thioflavone có hoạt tính ≥ so với falvone tương ứng
H. symplociformis
(14 compounds) 21
 ĐỊNH HƯỚNG SẮP TỚI
H. merguensis

Tiếp tục khảo sát thành phần hóa học chi Hedyotis
Bắt đầu nghiên cứu về chi Smilax
H. pressa

Thực hiện các phản ứng bán tổng hợp

Thử nghiệm hoạt tính sinh học
H. tenelliflora

H. nigricans

Smilax ferox Wall. Ex Kunth

H. linleyana
22
Tác giả xin chân thành cảm ơn:
Trường ĐH Sài Gòn
Trường ĐH Khoa học Tự nhiên Tp.HCM,
GS.TS. Nguyễn Kim Phi Phụng và nhóm nghiên cứu
đã hỗ trợ và giúp đỡ cho tác giả hoàn thành báo cáo này.