‫علم األحياء المجهرية‬

‫نمو وتكاثر البكتيريا ‪ ,‬مراحل النمو‬

‫مواضيع الدرس‬

‫القسم ”أ“ ‪:‬‬

‫تكاثر البكتيريا بطريقة االنقسام الخلوي وتكاثر الجنسي‬
‫عزل بكتيريا وتنميتها (وسط تنمية صلب وسائل ‪ ,‬مستعمرات ‪ ,‬زراعة عزل)‬
‫وسائل لتقدير عدد البكتيريا‬
‫وسائل لتشخيص البكتيريا‬

‫قسم ”ب“‪ :‬مراحل نمو البكتيريا‬

‫مرحلة التكيف (الركود)‬
‫مرحلة النمو األسي‬
‫مرحلة الثبات‬
‫مرحلة الموت واالنحدار‬
 ‫في ظروف مناسبة تتكاثر البكتيريا بوتيرة سريعة جداً‬

‫عندما يتم زرع بكتيريا على وسط غذائي تستطيع ان تتكاثر فيه ويتم حضنها بظروف مناسبة فانها تنقسم بوتيرة‬
‫سريعة‪ .‬وخالل ‪ 24‬ساعة يمكن أن نحصل من خلية بكتيريا منفردة على ما يقارب ‪( 100,000,000,000‬مئة‬
‫ميليار!) خلية بكتيريا ‪.‬‬

‫تحتوي كل مستعمرة من مستعمرات البكتيريا التي تظهر في الصور على عدد هائل من البكتيريا ‪.‬‬

‫‪CDC/ Courtesy of Larry Stauffer, Oregon State Public Health Laboratory.‬‬

‫‪http://phil.cdc.gov/phil/details.asp‬‬

‫مستعمرات من بكتيريا بروتسيال‬

‫‪Photo: James Gathany. Content Providers(s): CDC (#7925).‬‬
‫‪http://phil.cdc.gov‬‬

‫مستعمرات من بكتيريا ليجيونيال‬ ‫سنتناول في هذه المعروضة تكاثر البكتيريا‬

‫والعوامل المؤثرة على وتيرة التكاثر ‪.‬‬
‫‪2‬‬
 ‫في ظروف مناسبة ‪ ,‬تتكاثر البكتيريا بوتيرة سريعة‬

‫تتكاثر البكتيريا بطريقة االنقسام الخلوي‪ .‬خاليا البكتيريا الناتجة بعد االنقسام مطابقة تماما ً لخلية البكتيريا األصلية‬
‫ولها شحنة وراثية مطابقة لها ‪.‬‬
‫هذا الشكل من التكاثر‪ ,‬المرتكز على انقسام الخاليا إلى قسمين وبدون إنتاج بويضات وخاليا منوية‪ ,‬يسمى تكاثر‬
‫الجنسي ‪.‬‬

‫‪CDC/ Evangeline Sowers, Janice Haney Carr‬‬

‫بكتيريا ‪ E.coli‬أثناء االنقسام‬

‫‪3‬‬
 ‫مراحل انقسام خلية البكتيريا‬

‫مراحل في انقسام خلية البكتيريا‬

‫‪4‬‬
 ‫من أجل ماذا يتم تنمية بكتيريا في المختبر ؟‬
‫أحيانا ً تكون هنالك حاجة لتنمية بكتيريا بظروف اصطناعية في المختبر ‪ ,‬الستعمالها واستعمال نواتجها ‪ ,‬ومن‬
‫أجل تشخيصها ‪.‬‬

‫فيما يلي بعض األمثلة ‪:‬‬

‫أ‪ .‬تشخيص مسببات أمراض‬
‫تشخيص البكتيريا وأحياء مجهرية أخرى بمسطحات حنجرة ‪ ,‬وفي فحوصات البول والبراز ‪.‬‬

‫ب‪ .‬تحديد جودة الغذاء‬

‫في مصانع األغذية يأخذون عيّنات من الغذاء إلجراء فحوصات لتشخيص بكتيريا وأحياء مجهرية أخرى‬
‫لتحديد كميتها‪ .‬وقد حددت وزارة الصحة معياراً لتركيبة األحياء المجهرية وكميتها القصوى المسموح بها في‬
‫الغذاء‪ .‬على سبيل المثال‪ :‬فإن المعيار شديد للغاية بالنسبة لغذاء األطفال ‪.‬‬

‫ت‪ .‬استعمال في الصناعة‬

‫في صناعة منتجات األلبان ينمون مستنبتات من بكتيريا حامض الحليب ‪ .‬وفي صناعة األدوية ينمون بكتيريا‬
‫أُدخل إليها جين إنتاج الإنسولين في عمليات الهندسة الوراثية ‪.‬‬

‫ث‪ .‬استعمال في األبحاث‬

‫على سبيل المثال‪ :‬ينقلون جينات بشرية للبكتيريا من أجل معرفة وظائف الجينات‪ ,‬وذلك حسب التغيير الذي‬
‫يطرأ لدى البكتيريا وحسب الزالل الناتج عنها ‪.‬‬

‫‪5‬‬
 ‫مثال عن تنمية بكتيريا من أجل البحث العلمي‬

‫أخذ عيّ نة من قاع البحر كي يتم تحديد أنواع البكتيريا الموجودة فيه وعددها ‪ ,‬من أجل بحث بيئي أُجري في‬
‫الواليات المتحدة ‪.‬‬

‫)‪Photo: Shrout, Bill, Photographer (NARA record‬‬

‫يمكن تنمية البكتيريا على نوعين من أوساط التغذية ‪:‬‬

‫وسط غذائي صلب ووسط غذائي سائل ‪ .‬تفاصيل – في الشرائح القادمة ‪.‬‬
‫‪6‬‬
 ‫وسط غذائي صلب‬
‫يتكون الوسط الغذائي الصلب من اآلجار ‪ .‬اآلجار مادة تشبه الجالتين الناتجة من الطحالب ‪ ,‬يذيبونه في ماء‬
‫ساخن ‪ ,‬يضيفون له المواد الغذائية الضرورية ويصبّونه في أطباق بتري‪ .‬عندما يبرد اآلجار فإنه يتخثر وتتكون‬
‫طبقة صلبة‪ .‬أفضلية اآلجار أن قسم ضئيل من البكتيريا يستطيع تحليله ولذلك يبقى كامالً وتنمو البكتيريا عليه ‪.‬‬

‫يزرعون البكتيريا ويحضنون الطبق بشروط درجات حرارة مناسبة ‪.‬‬

‫وبعد عدة أيام تظهر مستعمرات على سطح اآلجار‪ .‬وتتكون كل مستعمرة من نوع واحد من البكتيريا‪ .‬كل أفراد‬
‫المستعمرة متطابقون بالشحنة الوراثية ‪ ,‬ألن مصدرهم خلية بكتيريا واحدة ‪.‬‬
‫لكل نوع من البكتيريا يوجد مستعمرة خاصة والتي تختلف بشكلها ‪ ,‬بلونها ‪ ,‬بملمسها وأحيانا ً برائحتها عن‬
‫مستعمرات األنواع األخرى ‪ .‬لذلك فحص صفات المستعمرات هو أحد الوسائل لمعرفة نوع البكتيريا ‪.‬‬

‫فطر العفن‬

‫©‪istockphoto.com/Zirafek‬‬
‫تحتوي أطباق بتري على مستعمرات بكتيريا من أنواع مختلفة وكذلك على مستعمرات من فطريات العفن ‪.‬‬
‫‪7‬‬
 ‫وسط غذائي سائل‬
‫يتركب وسط التنمية السائل من ماء ومواد غذائية وال يحتوي على اآلجار ولذلك يبقى سائالً ‪ .‬يدخلون البكتيريا‬
‫الى وعاء يحتوي على الوسط الغذائي ويضعونه في شروط درجات حرارة مناسبة‪ ,‬عاد ًة بجهاز يهزه باستمرار ‪.‬‬
‫تتكاثر البكتيريا لكنها ال تبقى ملتصقة معا ً‪ .‬لذلك ال تتكون مستعمرات كما في الوسط الغذائي الصلب ‪ ,‬انما تنتشر‬
‫البكتيريا في الوعاء‪ .‬يتمثل االرتفاع بأعداد البكتيريا بالتعكّر ‪ ,‬فكلما زاد عدد البكتيريا ‪ -‬ازداد تعكر السائل ‪.‬‬

‫الزمن‬
‫يمكن قياس تعكر السائل بواسطة جهاز خاص يسمى سبكتروفوتومتر ‪ ,‬وبهذه الطريقة يمكن تحديد عدد البكتيريا في‬
‫كل مرحلة ‪.‬‬

‫مصدر ضوء‬ ‫عينة سائل من‬ ‫كاشف‬ ‫‪Skorpion87 at Wikimedia‬‬

‫وعاء التنمية‬ ‫سبكتروفوتومتر‬

‫‪8‬‬
 ‫لعد البكتيريا‬
‫طرق ّ‬
‫في حاالت كثيرة وعند تنمية البكتيريا من المهم معرفة عددها ‪.‬‬
‫فيما يلي وصف لثالث طرق لعدّ البكتيريا ‪ ,‬حسناتها وسلبياتها ‪ .‬في كل واحدة من الطرق الثالث ُتقاس عيّنة من‬
‫مستنبت البكتيريا‪ .‬أحيانا ً وبسبب عدد البكتيريا الهائل يجب تخفيف المستنبت‪ .‬تُعّد البكتيريا وبعد ذلك يت ّم حساب‬
‫عددها في العيّنة األصلية ‪.‬‬

‫الطريقة‬ ‫الوصف‬ ‫حسنات الطريقة‬ ‫سلبيات الطريقة‬

‫عدّ مباشر‬ ‫النظر من خالل المجهر إلى البكتيريا‬ ‫يتم عدّ بكتيريا ميتة سريعة‬
‫الموجودة على لوح زجاجي مقسم إلى خاليا ‪ ,‬بواسطة المجهر‬ ‫أيضا ً‬
‫وعد البكتيريا الموجودة في كل خلية‬
‫ّ‬

‫يتم عدّ بكتيريا حية زرع البكتيريا على طبق بتري ‪ ,‬االنتظار عدة عدّ البكتيريا‬ ‫بطيئة ‪ ,‬مطلوب‬
‫الحية‬ ‫أيام وعدّ عدد المستعمرات (للتذكير ‪ ,‬كل‬ ‫وقت حتى تكبر‬
‫مستعمرة مصدرها بكتيريا واحدة)‬ ‫المستعمرات‬

‫تقدير بمساعدة‬ ‫بمساعدة جهاز سبكتروفوتومتر يقيس مدى‬ ‫يتم عدّ بكتيريا ميتة ناجعة وسريعة ‪.‬‬
‫فحص التعكر‬ ‫التعكر‬ ‫أيضا ً والتي تؤدي ال تتطلب عمالً‬
‫كثيراً‬ ‫الى التعكر‬

‫‪9‬‬
 ‫تشخيص بكتيريا‬

‫تشخيص بكتيريا وتمييزها هو مرحلة أساسية في دراسات الكائنات الحية المجهرية واستعمالها في الصناعة ‪.‬‬
‫الطب – تشخيص سريع لنوع البكتيريا المسبب لألمراض ‪ ,‬يُم ِّكن تقديم عالج ناجع ضد المرض ‪.‬‬

‫هنالك طرق كثيرة لتشخيص بكتيريا ‪ ,‬ترتكز الطرق على اختالف ‪:‬‬
‫‪‬في مبنى البكتيريا أو مستعمراتها ;‬
‫تمييز شكل‪/‬لون‪/‬ملمس‪/‬حجم‪/‬رائحة المستعمرة ‪.‬‬
‫رد فعل لصبغة جرام (موجبة أو سالبة) ‪.‬‬
‫شكل البكتيريا (عصوي ‪ ,‬كروي أو لولبي) ‪.‬‬

‫‪‬في النشاط االيضي للبكتيريا ;‬

‫فحص نواتج أيضية خاصة بالبكتيريا مثل ‪ :‬حامض حليب ‪ ,‬استون ‪ ,‬كحول ميثان ‪.‬‬
‫فحص قدرة استغالل مواد خاصة موجودة في الوسط الغذائي (أنظر المثال في الشريحة القادمة) ‪.‬‬

‫‪ ‬في حساسية البكتيريا ألنواع مختلفة من المضادات الحيوية ;‬

‫‪‬في قدرة الحركة أو شكل الحركة ;‬

‫(بكتيريا ذات أسواط فقط تستطيع الحركة)‪.‬‬

‫‪‬بالشحنة الوراثية للبكتيريا ;‬

‫(طرق لتشخيص بكتيريا حسب االختالف بتسلسل القواعد في ال‪DNA -‬الخاص بها)‪.‬‬

‫‪10‬‬
 ‫مستعمرات لبكتيريا من أنواع مختلفة‬

‫مستعمرات بكتيريا الشاجيال‬ ‫مستعمرات بكتيريا السلمونيال‬

‫‪CDC. http://phil.cdc.gov/phil/details.asp‬‬ ‫‪CDC. http://phil.cdc.gov/phil/details.asp‬‬

‫‪Photo: James Gathany. Content‬‬

‫‪Providers(s): CDC/ CDC Connects.‬‬
‫‪http://phil.cdc.gov‬‬
‫مستعمرات بكتيريا الكوليرا‬
‫مستعمرات بكتيريا كوسميتيكوس‬ ‫‪ ‬‬

‫‪11‬‬
 ‫تلخيص مرحلي ‪ :‬نمو البكتيريا وتكاثرها‬

‫تتكاثر البكتيريا تكاثراً الجنسيا ً عن طريق انقسام كل خلية إلى خليتين ‪ .‬الخاليا الناتجة مطابقة وراثيا ً للخلية‬
‫األصلية ‪ .‬طول الفترة الزمنية بين انقسام وآخر مرتبطة بنوع البكتيريا وبظروف البيئة ‪.‬‬

‫يمكن تنمية البكتيريا في المختبر على وسط غذائي صلب أو سائل ‪ ,‬بهدف البحث العلمي ‪ ,‬الطب والصناعة ‪.‬‬

‫البكتيريا التي تنمو على وسط غذائي صلب تبقى ملتصقة معا ً وتكوّ ن مستعمرات ‪ .‬وتتركب كل مستعمرة من نوع‬
‫واحد من البكتيريا ‪ ,‬وكل أفرادها متطابقين بشحنتهم الوراثية ألن مصدرهم خلية بكتيريا واحدة ‪.‬‬

‫البكتيريا التي تنمو على وسط غذائي سائل ‪ ,‬ال تبقى ملتصقة معا ً‪ ,‬انما تنتشر في السائل ‪ .‬وكلما زاد عدد البكتيريا‬
‫زاد تعكر الوسط ‪.‬‬

‫بمساعدة زراعة عزل يمكن الحصول على مستعمرات منفردة (قليلة) من البكتيريا ‪.‬‬
‫من أجل الحصول على مستنبت نقي من البكتيريا وفيه كل خاليا البكتيريا متطابقة وراثيا ً ‪ ,‬تؤخذ عيّنة بكتيريا من‬
‫المستعمرة المطلوبة و ُتنقل لوسط غذائي مناسب ‪.‬‬
‫‪12‬‬
 ‫تلخيص مرحلي ‪ :‬نمو البكتيريا وتكاثرها‬

‫هنالك عدة طرق لعدّ البكتيريا ‪ .‬ومنها ‪:‬‬

‫عد مباشر بمساعدة المجهر ‪ ,‬زرع وعدّ المستعمرات ‪ ,‬تقدير بمساعدة فحص التعكر ‪.‬‬
‫ّ‬

‫هنالك أنواع كثيرة من الوسائل لتشخيص البكتيريا على أساس االختالف بصفاتها مثل مبنى الخلية ‪ ,‬رد الفعل‬
‫لصبغة جرام ‪ ,‬األيض والشحنة الوراثية ‪.‬‬

‫مصطلحات (من المنهاج) ‪:‬‬

‫عد بكتيريا ‪ ,‬تعكر ‪ ,‬صبغة جرام ‪.‬‬
‫زراعة عزل ‪ ,‬مستعمرات ‪ ,‬وسط تنمية ‪ّ ,‬‬

‫‪13‬‬
 ‫يوجد في الطبيعة عوامل تحدد وتيرة تكاثر البكتيريا‬

‫في الظروف الجيدة ‪ ,‬يمكن أن تنقسم البكتيريا كل عشرين دقيقة ‪ ,‬الفترة الزمنية المطلوبة كي تنقسم بكتيريا إلى‬
‫خليتين تسمى زمن الجيل ‪.‬‬

‫اذا استمرت هذه الوتيرة لفترة من الزمن‪ ,‬سُيغطى سطح الكرة األرضية بأطنان من البكتيريا خالل فترة قصيرة ‪.‬‬
‫ولكن هذا ال يحدث على أرض الواقع ‪ ,‬ألنه توجد في الطبيعة عوامل تحدّ من وتيرة النمو‪ ,‬مثل ‪ :‬تناقص المواد‬
‫الغذائية ‪ ,‬تراكم الفضالت السامة ‪ ,‬تغيير بدرجة حموضة الوسط والتنافس مع كائنات مجهرية اخرى ‪.‬‬

‫‪14‬‬
 ‫مراحل نمو البكتيريا – رسم بياني (اجابة لسؤال ‪)3‬‬

‫* شرح عن مراحل النمو – في الشريحة القادمة ‪.‬‬

‫انتبه!‬
‫أسئلة تتعلق بمنحنى النمو للبكتيريا تظهر بشكل كثير في امتحانات البجروت ‪ .‬هذا موضوع مركزي في مادة‬
‫علم األحياء المجهرية‪ .‬اجتهد أن تحل كل األسئلة القادمة باهتمام ‪ ,‬وتأكد من فهمك للحلول !‬

‫‪15‬‬
 ‫مراحل نمو البكتيريا – تفسير المراحل‬

‫مرحلة التكيف (الركود)‬

‫عندما ُتنقل بكتيريا الى وسط غذائي جديد‪ ,‬فإنها ال تتكاثر بشكل فوري إنما تمر بمرحلة تأقلم تسمى الركود او‬
‫المكوث ‪ .‬تنتج البكتيريا في هذه المرحلة االنزيمات المناسبة من أجل استغالل مصادر الغذاء الجديدة ‪ .‬وتنتج‬
‫المواد المطلوبة لنموها كالزالليات والحوامض النووية ‪ .‬تستمر هذه المرحلة حتى تصل البكتيريا إلى درجة إنها‬
‫تستطيع االنقسام ‪.‬‬

‫مرحلة النمو األسي‬

‫تنقسم البكتيريا بوتيرة ثابتة ‪ ,‬ويتضاعف عددها في كل جيل ‪ .‬توصف هذه المرحلة بالرسم على شكل خط متعامد‬
‫بشكل حاد ‪ .‬تستمر هذه المرحلة ما دامت شروط التنمية مناسبة ‪.‬‬

‫مرحلة الثبات‬
‫بسبب زيادة كثافة البكتيريا تسوء ظروف التنمية ‪ ,‬تتناقص المواد الغذائية وتصبح عامالً محدداً‪ .‬يضاف الى ذلك‬
‫تراكم إفرازات مواد سامة في الوسط الغذائي‪ ,‬األمر الذي قد يغير من درجة ال‪ .pH -‬وفي اعقاب ذلك تقل‬
‫وتيرة تكاثر البكتيريا ويموت بعضها ‪ .‬في هذه المرحلة يكون عدد البكتيريا الناتجة مساويا ً لعدد الوفيات‬
‫(البكتيريا الميتة)‪ .‬لذا يبقى حجم العشيرة ثابتاً‪ .‬يتمثل ذلك بخط مستقيم بالرسم ‪.‬‬

‫مرحلة الموت‬
‫تسوء ظروف البيئة أكثر وأكثر‪ ,‬وتيرة الوفاة تكون أعلى من وتيرة االنقسامات وتبدأ أعداد البكتيريا باالنخفاض ‪.‬‬

‫‪16‬‬
 ‫لماذا ُيستعمل محور ‪ Y‬لوجرتمي لوصف منحنى النمو ؟‬

‫‪100,000‬‬
‫محور لوجرتمي‬ ‫‪10,0000‬‬
‫‪10,000‬‬
‫‪1,000‬‬
‫‪100‬‬
‫‪10‬‬
‫‪0‬‬
‫الزمن‬

‫التغييرات بأعداد البكتيريا كبيرة للغاية (يتضاعف العدد في كل جيل) ‪.‬‬

‫ألنه لو تم استعمال محور ‪ Y‬عادي فستكون حاجة لمحور طوله عدة‬
‫امتار‪.‬‬

‫‪6000‬‬
‫‪ 5000‬عدد البكتيريا‬
‫‪4000‬‬
‫‪3000‬‬
‫‪2000‬‬
‫‪1000‬‬
‫‪0‬‬
‫الزمن‬
‫‪17‬‬
 ‫تلخيص نمو وتكاثر البكتيريا‬

‫تتكاثر البكتيريا بالتكاثر الالجنسي بواسطة انقسام كل خلية بكتيريا الى خليتين مطابقتين وراثيا ً للخلية األصلية‪.‬‬
‫المدة الزمنية بين انقسام وغيره مرتبطة بنوع البكتيريا وبظروف البيئة‪.‬‬
‫في ظروف جيدة ومناسبة تنقسم الكثير من البكتيريا كل عشرين دقيقة ‪ .‬في الواقع وتيرة نمو كهذه ال يمكن ان‬
‫تستمر لمدة طويلة بسبب سوء ظروف النمو (على سبيل المثال‪ :‬نقص المواد الغذائية واألكسجين وتراكم الفضالت)‪.‬‬
‫وتيرة تكاثر البكتيريا في أجهزة مغلقة غير ثابتة وتتمثل بأربعة مراحل ‪:‬‬
‫مرحلة التكيف ‪ ,‬مرحلة النمو األسي ‪ ,‬مرحلة الثبات ومرحلة الموت ‪.‬‬
‫يتأثر منحنى النمو من عوامل مختلفة‪ ,‬أمثلة ‪:‬‬
‫للبكتيريا المنقولة الى وسط غذائي من نفس النوع الذي مكثت فيه سابقا ً – ال يوجد مرحلة تكيف للبكتيريا المنقولة من‬
‫وسط غذائي غني لوسط فقير – يوجد مرحلة تكيف طويلة بشكل خاص والعكس صحيح ‪.‬‬
‫كلما كانت درجة الحرارة أقرب للدرجة المثالية‪ ,‬ترتفع وتيرة النمو (تقصر مرحلة التكيف ‪ ,‬وميل الخط البياني في‬
‫مرحلة النمو األسي يكون أكبر ‪ ,‬وتقصر بقية المراحل أيضاً) ‪.‬‬
‫في الصناعة ينمّ ون البكتيريا في الكيموستات ويحافظون على البكتيريا بمرحلة النمو األسي بمساعدة إدخال دائم‬
‫لوسط طازج واخراج وسط مستعمل ‪.‬‬

‫‪18‬‬