酸胺缩合反应总结

常见合成酰胺的方法
1.酰卤

2.酰基叠氮

3.酰基咪唑

4.混合酸酐

5.活化酯

6.缩合剂
 酰卤法
• 酰卤 ( 酰氯、酰溴和酰氟 ) 与氨或胺作用是合成酰胺的最简便的方法。该方法的优点是活性高，可以与大位阻的
氨基反应。
• 酰氯主要试剂：氯化亚砜 SOCl2 ，草酰氯（ COCl ） 2 ，三氯化磷 PCl3 ，三氯氧磷 POCl3 ， 五氯化磷 PCl5 。
催化量的 DMF 可以促进酰氯的生成
• 当分子中有对酸敏感的官能团存在时，可以用氰脲酰氯（ 2, 4, 6- 三氯 -1,
3, 5- 三嗪）（只需要 0.33eq 即可） /TEA 或者 PPh3/CCl4 条件形成酰
氯.
• 由于酰氯的活性太高，一般很难鉴定，有时为了判断酰氯是否生成，一般取出
一点加入过量的苄胺或甲醇等，通过 TLC 确认反应进行的程度 .
• 一般酰氯、酰溴与胺反应是放热的，有时甚至极为激烈，因此通常在冰冷却下进行反应
，亦可使用一定量的溶剂以减缓反应速度。 常用溶剂为二氯乙烷、乙醚、四氯化碳、
甲苯等。
• 由于反应中生成的卤化氢，因此需要用碱除去卤化氢，以防止其与胺成盐。有机碱和无
机碱均可用于此类反应，常用的有机碱有三乙胺、吡啶等，常用的无机碱有 Na2CO3,
NaHCO3, K2CO3, NaOH, KOH 等。有时也可不加任何碱直接由胺和酰氯高温回流反
应得到酰胺。

• 催化量的吡啶或 DMAP 可以促进酰氯和氨基的反应。

• 使用酰氯缩合的另一缺点就是产物容易消旋。可以使用酰氟来避免。酰氟还能够忍受对酸敏感的基团。例如： Fmoc ， Cbz ，甚至是叔丁酯。

常用试剂有：
（ 2, 4, 6- 三氟 -1, 3, 5- 三嗪）， N,N,N’,N’- 四甲基氯甲脒六氟磷酸盐，
DAST ， BAST
 酰基叠氮
•一般是用酰肼与亚硝酸钠反应制成酰基迭氮，然后与氨基反应形成酰胺键。
优点是迭氮法引起的消旋程度较小，比活化酯法效率更高，但是，酰基迭
氮中间体不稳定，产生的迭氮酸有毒，而且制备步骤繁琐。

•现在通常使用 DPPA 与羧酸反应生成酰基迭氮，这很好地解决了酰基迭氮

制备的问题。
 酰基咪唑
•应用羰基二咪唑 (CDI) 与羧酸反应得到活性较高的酰基咪唑，其反应
是分步进行，胺极易与活性酯反应得到相应的酰化产物。
•投反应时一般先让羧酸与ＣＤＩ反应１ｈ后，再加入胺。此反应不需要
额外加入碱，甚至胺的盐酸盐也能够反应。
•由于 CDI 会和过量的胺反应得到脲的副产物，因此其用量一定要严格控
制在 1 当量。
 混合酸酐法
•它是利用羧酸羰基的亲电性高于碳酸羰基，从而使氨基选择性的进攻羧
酸羰基形成酰胺键。混酐法具有反应速度快，产物纯度较高等优点，但
由于混酐的活性很高，极不稳定，要求反应在低温无水条件下进行，产
品也容易出现消旋现象。

•这一反应如果酸的 a- 位位阻大或者连有吸电子基团，有时会停留在混
合酸酐这一步。但加热可以促使其反应；这一反应也可用于无取代酰胺
的合成。
氯甲酸酯 ( 甲酯，乙酯，叔丁酯，苯酯，苄酯 ) 或 EEDQ 是最常用的生成混酐的试剂。
N- 羧基内酸酐法 (N-Carboxy anhydrides or Leuch’s anhydrides)
•另一类常用的是羧酸和磺酰氯生成的羧酸 - 磺酸的混合酸酐

•常用的磺酰氯有甲烷磺酰氯（ MsCl ），对甲苯磺酰氯（ TsCl ）和对

硝基苯磺酰氯（ NsCl ） , 对硝基苯磺酰氯由于其吸电子性，其与酸反
应生成活性更高的混合酸酐，一般二级胺和三级胺，甚至位阻很大的胺
都能顺利反应。
 活化酯法
•常见的活化酯有硝基苯酯（ PNP ）， 2, 4, 5- 三氯苯酯，五氯苯酯，
五氟苯酯（ PfOH ）， N- 羟基琥珀酰亚胺（ HOSu ）酯和 N- 羟基苯并三
唑酯（ HOBt ）等。与胺反应，条件温和，体系干净且可以极大地抑制消
旋现象。

•一般的操作步骤是先通过酯化的方法（如： DCC ）制备并分离得到活化

酯，再与氨基反应生成酰胺键。
 缩合试剂法
•该方法是目前应用最广的形成酰胺键的方法，同时也广泛地应用于酯键、
大环内酰胺和内酯的构建。

•这种方法通常是将羧基组份和氨基组份混合，在缩合试剂作用下，中间体
不经分离直接进行反应形成酰胺键。这样就无需预先制备酰卤、酸酐和活化
酯等羧基被活化的中间体，不仅简捷高效，而且可以有效地避免在活化中间
体分离提纯以及存放过程中产生的一些副反应。

•目前已报道的多肽缩合试剂非常繁多，从分子结构的角度上主要分为碳化
二亚胺类型、磷离子或磷酸酯类型和脲离子类型。
鎓离 子 或 磷 酸 酯 类 型 和 脲 鎓离 子 类 型
 碳化二亚胺类
发展最早和最常用的碳化二亚胺类缩合试剂是 DCC 。但由于反应生
成的二环已基脲（ DCU ）在大多数有机溶剂中溶解度很小，难以除去，
人们对 DCC 的结构进行了改进，发展了副产物的脂溶性很好的二异丙基
碳二亚胺 DIPCDI 和 BDDC 等和副产物水溶性很好的 1-(3- 二甲胺基丙
基 )-3- 乙基碳二亚胺 EDCI 。
 在常用的缩合剂中， DCC 和 DIC 的价格较为便宜。一般 DCC 和 DMAP
合用，使用 DCC 有一个最大的缺点就是反应的另一产物二环己基脲（ DC
U ）在一般的有机相溶解度很小但又都有一些微溶，因此通过一些常用的纯
化方法，重结晶，柱层析等等很难将其除得很彻底；由于二环己基脲在乙醚
中的溶解度相对要比其他溶剂小， 因此处理这类反应一般蒸掉反应溶剂后
加入乙醚，滤掉大部分的二环己基脲后再进一步处理。
•目前在药物化学中用的最多的是 EDCI ，其一个主要的特点就是其反应后
的生成的脲是水溶性的，很容易被洗掉，一般 EDCI 与 HOBt 合用。有时酸
的位阻较大或者连有吸电子基团反应或 停留在活性酯这一步。
•这类缩合剂活性相对要差一些，一般需要和酸先活化 1 小时，再将胺加入。
•在库反应中，此类缩合剂最常使用的是 EDCI ，在分离过程中因其极性
相对较大，不易与产物包裹在一起。不过在产物极性大的情况下，分离过
程中可能会带有 174 的杂 MS 。
 使用这类缩合剂时，在反应的第一阶段酸对碳二亚胺的加成中间体
其并不稳定，往往会导致产物有较大程度的消旋，为此通常要加入 DMAP ，
4-PPY ， HOSu ， HOBt ， HOAt 或 HOOBt 等添加剂一起使用来抑制产
物消旋，同时也可有效地抑制其自身重排成 N- 酰基脲等副产物。
 磷鎓离子或磷酸酯类
目前常用的磷离子或磷酸酯缩合试剂主要有
鎓离 子 或 磷 酸 酯 缩 合 试 剂 主 要 有 BOP ， PyBOP ， BOP-
Cl ， FDP ， FDPP ， DEPBT ， PyBroP 等。这类缩合试剂形成酰胺键的机
理主要是在碱性条件下羧基负离子进攻缩合试剂生成相应的酰氧基磷正离子
或者碳磷混酐，然后此活泼中间体受苯并三唑氧基，卤素或者五氟苯酚负离
子的进攻生成活化酯或酰卤，再与氨基反应形成酰胺键。
•BOP 和 PyBOP 是 HOBt 衍生的试剂， BOP 试剂因为实验操作简单以及它
能够提高缩合反应速度，所以它广被泛应用于肽的合成当中，缺点是在反应
过程中产生致癌的有毒物质六甲基磷酰亚胺 (HMPA) ；而 PyBOP 就避免了
这一缺点，因为它用吡咯啉代替了二甲胺。 PyBOP 是我们常用的缩合剂中
活性最高的，一般在 其他方法不反应的条件下考虑。

•BOP-Cl 和 PyBroP 都是形成活泼的酰卤中间体，可以高效地促进有空间

位阻的酰胺键的形成且消旋较小。但其缺点是，当胺的反应活性低时，常常
得到酰化的唑烷。另外， BOP-Cl 的溶解性较差，导致反应时间较长，有时
会长达四五天，常用 DMF 做反应溶剂。

•FDP 和 FDPP 都是五氟苯酚衍生的试剂，在多肽合成中具有产物收率高，

后处理简单等优点，但不适用于有空间位阻多肽的合成， FDPP 特别适用于
环肽的合成。

•DEPBT 是 HOOBt 衍生的磷酸酯，其特点是产物的消旋较小。

 脲鎓离子类型
脲离子型缩合试剂种类繁多，与磷离子型缩合试剂类似，
鎓离 子 型 缩 合 试 剂 种 类 繁 多 ， 与 磷 鎓离 子 型 缩 合 试 剂 类 似 ，HOBt 和 HOAt
衍生的脲离子型缩合试剂参与缩合反应的主要中间体分别是羧基组份的苯并三
鎓离 子 型 缩 合 试 剂 参 与 缩 合 反 应 的 主 要 中 间 体 分 别 是 羧 基 组 份 的 苯 并 三
唑酯和 7- 氮杂苯并三唑酯。当 α- 卤代的脲正离子型缩合试剂参与多肽合成时，
反应的活泼中间体主要是羧基组份的酰卤和酸酐。
HATU 是活性最高的碳盐类缩合剂，但由于它价格昂贵很少用于工业化生产，
鎓盐 类 缩 合 剂 ， 但 由 于 它 价 格 昂 贵 很 少 用 于 工 业 化 生 产 ，
而且经常是在其它缩合剂效果不好时才用到它。

HBTU 相对来说要经济的多，而且可以用于大多数缩合反应，然而其利较低的
收率是限制用于大量生产的主要原因。

HCTU 活性较高，可以代替 HATU 用于工业化生产，其高活性要归功于有更好活

性的 Cl-HOBt 中间体。

TSTU 和 TNTU 可以用于含水溶剂的酰胺化反应。

若将 HATU 和 HBTU 的二甲胺基变为四氢吡咯基可以得到活性比它们更高的

HAPyU,HBPyU, 但这些试剂的价格极其昂贵 .
鎓盐类缩合剂在局部浓度不均的情况下，容易出现副反应。
以 HBTU 为例：

所以在反应的时候，一般的加料顺序，应该是将酸，碱以及 HATU 加
到溶剂中，搅 拌均匀再将胺加入，以避免此类副产物。
若产品极性较大的情况下，与 HBTU 代谢的产物包裹在一起，会产生
117 的杂 MS 。由于此副产物 254 下没有紫外吸收，所以在产物
极性较大，推荐选取机分
TFA 带来的副产物
若前一步反应为 DeBoc ，成 TFA 盐的话，反应之前最好先游离一下，因
为反应可能会有三氟乙酰化的副产物。此类副产物最常见于脂肪类小分子酸
胺 coupling 的时候。

DMF 带来的副产物
DMF 对于许多化合物来说都是良溶剂，并且许多胺即使成盐，在 DMF 中也
有不错 的溶解度，所以许多缩合反应大家都会选取 DMF ，但是在反应选取
的碱比较强的情况下，会产生以下副产物：

在反应中如果遇到此类情况，可以用 DMA 来代替 DMF ，会避免此副产物的

出现。
碱的选取
一般情况下， TEA 和 DIEA 是酸胺缩合最常用的碱，不过在投库反应中，这
两种碱 在机分的时候 MS 脱尾，可能会在产物中包裹 101/130 的杂
MS ，导致 QC 无法通过，可以选用 NMM 来代替，目前为止，还没有发现
NMM 导致 QC 不过的情况。对于有手性反应来说，文献报道中显示， TEA
可能会造成更多的消旋，相对来说 DIEA 要好很多， NMM 还没有看到相关的
报道。

敏感基团
对于有苯酚类的酸胺缩合，有报道称选用无机碱会尽可能避免酯的生成，常
用 K2CO3 等。
对于吲哚类，咪唑等含有氨基的酸胺缩合反应，如果选取 HATU 的话，要注
意量的控制，避免最终产物出现副反应， MS 加 99 。
常用缩合剂组合：

1) EDCI(1.2eq)+HOBT(1.2eq)+Et3N(3eq)

2) EDCI(1.2eq)+DMAP(1.2eq)+Et3N(3eq)

3) HATU(1.2eq)+DIPEA(3eq) or HATU(1.2eq)+Et3N(3eq)

4) TBTU(1.2eq)+DIPEA(3eq) or TBTU(1.2eq)+Et3N(3eq)

常用的溶剂：
DCM 、 MeCN 、 DMF 、 DMSO ， DMA 。
最常用的是 DCM ，若 DCM 不溶，则用 DMA 效果比较好。
 季胺盐类
4-(4,6-dimethoxy-(1,3,5)triazin-2-yl)-4-methyl-
morpholinium
chloride (DMTMM) 不仅有利于活性酯的形成，还能促进活性酯与氨基的
偶联。另一优点是反应不需要加入碱，副产物容易通过水洗除去。
 酸胺缩合反应的经验总结
第一、 我们可以先分别试一下 TBTU 和 HOBT/EDCI ，若是反应结果不是令
人满意，这种情况下我们一般再试 HATU ， PyBOP(PyAOP) ， PyBroP 。

第二、 若上面的条件得不到我们想要的结果，那么我们就可以用 CDI 来试

验。把酸溶解在二氯甲烷里，分批加入 CDI ，点板反应完毕后，转移到滴液
漏斗中，滴加到胺的二氯甲烷溶液里，一般效果会很好。

第三、 若是还不行，那就只有把酸做成酰氯了，然后在三乙胺的条件下和胺
反应做成酰胺，这一般是最后的方法了。

第四、 不过还有一种可以试验的条件，就是用羧酸盐，用羧酸盐与胺做缩合
反应。
谢谢！