CROMATOGRAFIA DE FLUIDOS SUPERCRITICOS

PRESENTADO POR:
AQUILIO AYOLA, LEONARDO HERNANDEZ, YORMAN
GARIZADO, YORMARIS ORJUELA Y YAMARLYS
SANDOVAL

2023-1
 ¿QUE ES LA CROMATOGRAFIA DE FLUIDOS SUPERCRITICOS?
También conocida como SFC, es un método que combina las técnicas de la
cromatografía HPLC o líquida y la cromatografía de gases.
Es una forma de cromatografía de fase normal que se utiliza para el análisis y
purificación de moléculas de bajo a moderado peso molecular.
-Sirve para separar los compuestos no volátiles o inestables que no pueden
separarse con el gas o no se pueden detectar mediante el HPLC.
-Se usa para analizar concentraciones de compuestos y moléculas de pesos
elevados. Utiliza el dióxido de carbono para que la ruta de flujo pueda adquirir
una presión bien alta.
-Puede detectar la ionización de una llama, la captura de electrones y el
espectrómetro de las masas.
 EVOLUCION DE LA SFC

En 1962 se desarrolló la técnica de la

cromatografía de fluidos SFC (en
inglés) . La idea de esta técnica surge
con un propósito claro de combinar
la cromatografía líquida (HPLC) y la
cromatografía de gases (GC) en
busca de una cromatografía híbrida
(HPGC) que proporcionase las
ventajas de ambas y permitiese la
detección y análisis de compuestos
no volátiles e inestables.
 FUNDAMENTOS
 La Temperatura Critica (Tc) de una sustancia, es aquella temperatura por
encima de la cual no puede existir en fase liquida independientemente de la
presión.
 La Presión de vapor de una sustancia cuando alcanza la Tc es su Presión
Critica Pc.
 Una sustancia a temperatura y presión por encima de su Tc y Pc “Punto
Crítico” se denomina FLUIDO SUPERCRITICO
 Un FLUIDO SUPERCRITICO tiene las propiedades de expansión de un
gas y la densidad de un líquido (e.j. para el CO2 0,2 a 0,5 g/cm3), lo que le
proporciona una notable capacidad para disolver moléculas grandes no
volátiles.
 ¿CUAL DE ESTAS AFIRMACIONES ES VERDADERA?

A. la cromatografía de fluidos no sirve para separar los compuestos no

volátiles.
B. Puede detectar la ionización de una llama, la captura de electrones
y el espectrómetro de las masas.
C. Detecta los carbohidratos presentes.
D. son correctas A y B
 COMPUESTOS SUPERCRÍTICOS
-Dióxido de carbono(CO2) Dióxido de carbono (CO2) supercrítico:
-Agua (H2O) • Ampliamente disponible y seguro
-Amoníaco (NH3) • Baja toxicidad
-Metano(CH4) • Características ajustables
-Etano(C2H6) • Compatibilidad con detectores
-Propano(C3H8)
-Óxido de nitrógeno(NOx)
-Óxido nitroso (N2O) Óxidos de nitrógeno NOx:
-Azufre hexafluoruro(SF6) • Mayor polaridad
-Óxido de azufre(SOx) • Amplio rango de polaridad
-Hidrógeno (H2) • Compatibilidad con analitos polares
-Nitrógeno (N2)
-Etileno(C2H4)
 ¿QUE SE CONSIDERA PARA QUE UN FLUIDO O GAS
SE ENCUENTRE EN SU PUNTO CRITICO?
Un fluido supercrítico requiere de condiciones especiales en donde se requiere
en el caso del agua un alto suministro de calor y altas presiones
 INSTRUMENTOS DE LA
CROMATOGRAFIA

La instrumentación empleada en la
cromatografía de fluidos supercríticos
debe incorporar un horno termostato para
controlar con precisión la temperatura de
la fase móvil y un sistema de
contrapresión (que sirve para mantener la
presión de la columna en el nivel
deseado y para convertir el eluato a gas y
arrastrarlo al detector)
Imagen No1
¿CUAL DE LAS SIGUIENTES ES UNA PROPIEDAD CRÍTICA
DE LOS COMPUESTOS?

A. Peso molecular
B. Viscosidad
C. Tamaño
D. Eficiencia
COLUMNAS. Hay dos tipos
principales de columnas utilizadas
con SFC: tubular abierta y
empaquetada, como se ve a
continuación. Las columnas
tubulares abiertas son las más
utilizadas y están recubiertas con
un material de sílice reticulado a- columna tubular abierta
para una fase estacionaria. b- columna empaquetada
LA FASE MÓVIL. es capaz de
interactuar adecuadamente con la
muestra, empujar rápidamente a
través de ella y arar fuertemente a
través de la muestra para separarla.
La fase móvil también determina en
parte cómo se separa: primero
llevará a cabo moléculas similares,
aquellas con polaridades similares,
y seguirá gradualmente con
moléculas con mayores
polaridades.
LA FASE ESTACIONARIA. Es un
compuesto neutro que actúa como
fuente de “fricción” para ciertas
moléculas en la muestra a medida que
se deslizan a través de la columna.
manteniéndose hasta que haya pasado
suficiente de la fase móvil para
atraerlas. La combinación de las
propiedades en la fase estacionaria y la
fase móvil ayudan a determinar la
resolución y velocidad del
experimento.
 ¿CUÁLES SON LAS PRINCIPALES COLUMNAS
UTILIZADAS CON SFC?

A.Tubular cerrada y no empaquetada

B.Tubular abierta y empaquetada
C.Ninguna de las anteriores
EL DETECTOR. Técnicamente no forma parte del proceso de
separación cromatográfica, el detector sigue desempeñando un papel
importante: identificar los componentes de la solución. el detector
tiene como objetivo definir de qué está hecho cada uno de estos
componentes.

Los dos detectores que se encuentran con mayor frecuencia en los

instrumentos SFC son: -los detectores de ionización de llama (FID)
y -los espectrómetros de masas (MS):
-Los FID operan ionizando la muestra en una llama alimentada por hidrógeno.
Al hacerlo, producen partículas cargadas, que chocan con los electrodos, y las
partículas son posteriormente cuantificadas e identificadas.

-MS opera mediante la creación de una pulverización ionizada de la muestra, y

luego la separación de los iones en función de una relación masa/carga. La
relación masa/carga se grafica frente a la abundancia de iones y crea una
“huella” para el químico identificado. Esta huella química se compara luego
con una base de datos para aislar qué compuesto era. Esto se puede hacer para
cada elución única, haciendo que el SFC sea aún más útil que si estuviera solo.
 APLICACIONES DE LA
CROMATOGRAFÍA DE
FLUIDOS SUPERCRÍTICOS

La cromatografía SFC se Se utilizan para separar Se utiliza para el análisis y

utiliza, especialmente, en compuestos y la separación de productos
compuestos no volátiles o sustancias químicas naturales, medicamentos,
termolábiles, que suelen para los que otros tipos drogas, plaguicidas,
descomponerse ante de cromatografías no herbicidas, aditivos,
cualquier aumento de serían demasiado explosivos y una gran
temperatura, haciéndola adecuados. variedad de alimentos que
inviable para el método no se descomponen
de separación de fácilmente con los cambios
sustancias con gases. térmicos.
¿CÓMO SE GENERA LA SEÑAL ELÉCTRICA EN LOS
DETECTORES FID?

A. Mediante la captura de los cationes

B. Mediante la combustión y captura de iones
C. No se registra señal eléctrica
ANÁLISIS DE PLAGUICIDAS EN FRUTA Y VERDURA MEDIANTE
CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS ACOPLADA A
ESPECTROMETRÍA DE MASAS

Autores: Victor Manuel Cutillas Juárez

Directores de la Tesis: Amadeo Rodríguez Fernández-Alba
(dir. tes.), Carmen María Ferrer Amate (codir. tes.)
Lectura: En la Universidad de Almería ( España ) en 2022
 RESUMEN
La aplicación de productos fitosanitarios y la evolución de estos anualmente,
supone uno de los factores determinantes en el crecimiento del sector agrícola
actual. No obstante, este tipo de productos requieren de un control para evitar
que una aplicación errónea desemboque en un riesgo para la salud alimentaria
y/o medioambiental. Las técnicas, sin duda, más empleadas para llevar a cabo el
análisis de estos compuestos son la cromatografía líquida y la cromatografía de
gases, ambas acopladas a analizadores de masa de triple cuadrupolo (QqQ).
Estas técnicas cromatográficas abarcan un rango bastante amplio de plaguicidas
de diversa polaridad que son capaces de detectar con elevada sensibilidad. Sin
embargo, los fitosanitarios también se aplican a matrices denominadas
complejas, entendiendo por matrices complejas aquellas que contienen una gran
cantidad de compuestos químicos naturales que se extraen junto con los
compuestos de interés y afectan seriamente a la selectividad del análisis
 OBJETIVOS

• Evaluación del comportamiento de SFC con matrices complejas como

las especias y determinación del grado de reducción de efecto matriz, así
como el incremento de sensibilidad asociado al mismo.
• Desarrollo de un método multiresiduo de 162 plaguicidas y validación
de este siguiendo las directrices del documento SANTE: recuperaciones,
linealidad, efecto matriz... etc. Comprobación de la operatividad del
método a través del análisis de muestras reales provenientes de distintos
países.
• Estudio de la sensibilidad en SFC empleando diferentes temperaturas en
la fuente de ionización y observar si el comportamiento de la fase móvil
es similar al de LC.
 METODOLOGIA
La cromatografía de fluidos supercríticos acoplada a espectrometría de
masas ha sido utilizada en numerosos métodos de análisis en laboratorios
de rutina. Existen amplios campos de aplicación en los que esta técnica ha
sido muy útil, la mayoría de ellos concuerdan con aquellos compatibles
con las otras dos técnicas predominantes de cromatografía (LC y GC). En
un inicio, SFC era una técnica muy centrada en la separación quiral de
compuestos caracterizados por su baja polaridad. Sin embargo, esta
perspectiva de análisis se ha ido ampliando y actualmente el análisis
multiresiduo está muy extendido en el ámbito farmacéutico, alimentario y
medioambiental.
 ¿CUALES SON LAS TÉCNICAS MAS EMPLEADAS PARA
REALIZAR EL ANÁLISIS EN LOS PRODUCTOS
FITOSANITARIOS?

A.Cromatografía liquida y cromatografía de gases

B.Cromatografía liquida y cromatografía solida
C.Cromatografía liquida y cromatografía liquida