CHARLS 生物样本采集

处理流程

—— 粪便、舌苔和尿液

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内容
 研究意义

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一个例子——减肥
 减肥的治疗方法
 运动
 饮食控制
 手术
 Liu, R., Hong, J., Xu, X. et al. Gut microbiome and serum
metabolome alterations in obesity and after weight-loss
intervention. Nat Med 23, 859–868 (2017).
https://doi.org/10.1038/nm.4358

 益生菌 / 肠道微生态制剂 / 粪便移植

 Allegretti, J. R. , Kassam, Z. , Mullish, B. H. , Chiang, A. , &
Thompson, C. . (2019). Effects of fecal microbiota transplantation
with oral capsules in obese patients. Clinical Gastroenterology
and Hepatology, 18(4).

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采集和研究意义
微生物，不可忽视的第二套基因组

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采集和研究意义

 人体共生微生物参与调解人体的一系列生理生化反应，对
人体健康起着不可或缺的作用
 超过 90% 的微生物群落生活在人的消化道里，称为“肠道菌群”
 口腔菌群既是肠道菌群的来源之一，又可用于代谢性、免疫性、
神经退行性疾病和胃肠道肿瘤标志物的研究。

 共生菌群在人体内维持着一定的动态平衡，会随着年龄发
生变化，与很多疾病的发生密切相关，比如哮喘、肥胖、
糖尿病、心血管疾病、癌症、精神疾病等等。

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采集和研究意义

 尿液智能检测
 便捷、快速、易操作
 适合于一般人群对于肾脏疾病和泌尿系统疾病进行自我筛查，或
检测疾病进展情况
 适用于大规模人群的肾脏疾病筛查

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研究方法

宏基因组学（ Metagenomics ）又称为环境基因组学，其研究对象是直接从环境中

获得的全部微小生物的遗传物质的总和。

宏基因组鸟枪法测序（ Metagenomic shotgun sequencing ）作为微生物学领域继

显微镜发明之后又一重大技术突破，使得直接研究微生物群落成为可能，无须分离
培养即能发现大量微生物“暗物质” 。

宏基因组可用于人体共生微生物对人体健康影响的研究，包括：

(1) 人体各个部位的共生微生物的群落结构以及与健康之间的关系，如口腔，
生殖道，消化道；

(2) 人体肠道微生物与慢性复杂疾病发生发展相关的内容，从“饮食 - 人体共

生微生物 - 宿主代谢”的角度尝试和寻找新的健康管理及疾病干预手段。

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研究内容

2010 ： 124 个来自

于欧洲人肠道微生物
的样本
2014 ：包括了亚洲
、欧洲和美洲三个地
区共 1267 个个体的
数据

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研究内容

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研究内容
CHARLS 调查得到一个全国代表性样本，通过体检收集受访者的
尿、粪便和舌苔样本
通过高通量测序获得肠道、口腔、尿液微生物数据，关联问
卷表型、体检指标、代谢数据等进行数据分析，探究人体共生
微生物的结构与功能特征。
挖掘人体共生微生物在人类健康老年化中所起到的作用。
揭示微生物变化与人体健康及慢性疾病发生之间的的关联，
助力健康管理，给疾病的早期预防和治疗提供科学依据。
研究衰老微生物菌群的特征，将有助于理解并改善晚年的健
康状况，为健康养老产业提供新的动力和资源。
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研究的合理合法性
 项目获得中华人民共和国科技部人类遗传资源采集许可
 中国人类遗传资源行政许可事项 2021 年 第九批审批结果， 2021-
05-19 。 https://fuwu.most.gov.cn/html/tztg/xzxkzx/20210519/123123879.html
 本项目《中国中老年人健康状况影响因素研究》由“北京大学第一医院”牵
头申报生物样品采集的科技部审批，申报的参与方有“北京大学国家发展研
究院”和“深圳华大生命科学研究院”。
 本次申报的牵头人张路霞教授是北京大学健康医疗大数据国家研究院常务副
主任和院长助理，北京大学第一医院肾内科主任医师 、教授、博士生导师
， CHARLS 项目的副负责人之一。

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研究的合理合法性

 项目获得北京大学
第一医院伦理委员
会审查批准

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生物样本采集流程

概述

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生物样本采集、运输及储存条件
采集对象：所有参加问卷调查的受访者。
采集时间：完成过滤问卷之后（集中体检或入户时收集）。

样本
采样量 取样时间 取样人 取样要求
类型

豌豆粒大小或 本人 / 家 刮取中间内部段，请避免被
粪便 体检前后某天排便时 人或照料 尿液和水等污染 ( 建议排便
沾满棉签头 者 / 访员 前先排空尿 )
勿刮取口腔伤口部位，尽量
拭子在舌头上 采样专
舌苔 体检当天 避免接触牙齿，不要触碰拭
来回移动 10 秒 员 / 访员
子的折断点以下的部位

体检当天晨起空腹第 本人 / 家
尿液 20ml 尿液 弃掉前段尿液，取中段
1 次或第 2 次排尿时 人

现场储存：室温暂存；运输及保存条件：常温运输

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生物样本采集的耗材
样本 耗材 包含元素 发放说明

一次性采样拭子、样本收集管（含稳定剂）、
粪便采
粪便 一次性无菌手套、采样纸、防震袋、说明书、 入户访问时全部发放
样包
外包装袋

舌苔采 采样拭子、样本收集管（含保存液）、说明
舌苔 不发放，访员采集
样包 书、外包装袋

尿液采 一次性尿杯、一次性吸管、样本收集管（含
样包 保存液）、一次性无菌手套、外包装袋
现场发放带盖尿杯和
尿液
一次性尿杯
尿液检 定制化尿液试纸、试纸定位比色板、船型尿
测套装 杯、带盖尿杯（单独包装）

所有采样包均由深圳华大生命科学院统一邮寄至访问队伍负责的调查区县。
项目组会提供尿液检测套装、一次性手套、纸巾、一次性塑料袋。

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对采集对象的要求
时 间 要 求

体检前一天 正常饮食

（ 1 ）勿刷牙，勿进食，勿饮水
体检当天晨起
（ 2 ）如果受访者在采样前必须服药，可以服药，记录为非空腹
采样前 30 分
勿吸烟，勿饮酒，勿嚼口香糖，勿使用漱口水，勿清水漱口，勿饮水
钟
（ 1 ）弃掉前段尿液，取中段
尿液
（ 2 ）回答采样问题记录
（ 1 ）伸出舌头 10 秒以上
舌苔
采 （ 2 ）回答采样问题记录
集 （ 1 ）粪便不要被尿液和水污染
时 （ 2 ）刮取粪便中间内部段
粪便 （ 3 ）刮取时请避免接触其他物体 ( 如尿液和其他分泌物 )
（ 4 ）取样后立刻保存到样本收集管中，联系访员取样
（ 5 ）记录采样问题

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生物样本采集流程（总）

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生物样本采集流程

1. 粪便样本采集

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耗材——粪便采样包
说明书

 套装内容
 一次性采样拭子
样品收集管（含保存液） 一次性手套

采样纸 样本收集管

防震袋 采
样
说明书 纸 防
震
外包装袋 袋

 一次性塑料袋或保鲜袋
外包装袋 采样拭子

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耗材——粪便采样包

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采样耗材发放
 发放时间：做完过滤问卷后
 发放与回收人：生物采样专员或该户的访员
 发放物品：自封袋 1 个，含粪便采样包 1 套、一次性塑料
袋或保鲜袋 1 个
 检查收集管上的条码，未贴条码的请访员粘贴粪便样本的条码
 确认发放数量，其中男女人数
 把采样便包和一次性塑料袋装入自封袋
 同一户 2 个受访者时，避免样本混淆的方法
 在自封袋上粘贴带背胶贴纸，填写受访者姓名、性别和年龄
 男性采用蓝色边框贴纸，女性采用红色边框贴纸
 在女性的采样管上贴上标记 ( 方便不识字、视力不佳者区分 )

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采样问题记录

只需要受访者记忆 / 记录粪便样本采集时间，其他问题取样时询问，结果直接填
写到 APP 中。问题 4 和 5 已新增到入个人问卷中。
所有信息最终要填写到 APP 中，纸质信息在 APP 中拍照记录。

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采样培训
 确定粪便标本采样人
 判断受访者能否自行采集粪便标本？
 可以拧开收集管（手部力量）
 可以把棉签放入收集管，不沾染外壁（视力和精细动作）
 不会倾倒收集管（手不抖）

 受访者家中是否有人可以帮助采集粪便标本？
 如以上均无，访员可充当粪便标本采样人

 观察受访者家厕所 ( 坐便 / 蹲便 / 其他 ) ，确定粪便留取方法
 培训采样人员：演示采样方法，播放采样视频
 不可拆开采样拭子包装，避免污染

 采样后，及时填写《粪便采样问题记录》

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粪便留取——坐便马桶
 提起马桶盖，取出采样纸，将采样纸如下中图放在马桶上，
两侧贴于马桶外侧，竖端贴于马桶前段，以使中间留有弧度
。然后盖上马桶盖。将粪便排泄于纸上，注意不要被尿液污
染 ( 建议排便前先排空尿 ) 。

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粪便留取

 蹲便
 请在便池中解手取样，尽量避免样本被污染。 ( 建议
排便前先排空尿 )

 其他
 准备好统一采购的可降解塑料袋，将便排在塑料袋里，应避免不要被
尿液污染 ( 建议排便前先排空尿 ) 。

 适用于遇到农村比较深的蹲坑厕所，无法直接取样时。

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粪便样本采集
 取出采样拭子，蘸取足量的粪便——沾满棉签头（湿便）或
豌豆粒大小（如果粪便较干不能沾到棉签头）。刮取中间内
部段，请避免接触其他物体 ( 如尿液和其他分泌物 ) 。
 打开样品收集管的管盖，推动采样拭子的推杆，将沾有样品
的棉签头推入样品收集管中。请注意切勿沾染外壁，勿倾倒
收集管。
访员注意：排泄粪便后请立刻取样，排便超过 30 分钟勿取样。

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粪便采样流程

 旋紧样品收集管的管盖，并检查确认。将样
品收集管放回所附的防震袋内。把防震袋放
入自封袋中封口（收集管竖立放）
 填写《粪便采样问题记录》。

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粪便样本的回收
 排便后由受访者带回集中体检现场回收，或访员上门回收

 核对受访者信息（以避免出现样本错拿）：
 询问受访者姓名、性别

 自封袋和收集管的标记

 核对采样标本
 收集管中是否有采样棉签？ 访员注意：收集管中无棉签或保存液未
完全浸泡棉签头时（保存液明显变少）
 采样量是否足够？ ，需要重新发放采样包，经过受访者同
意后重新采样。
 棉签是否完全浸入保存液？

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粪便样本的回收
 核对《粪便采样问题记录》的填写：
 所有问题均填写，时间填写合理

 不识字的受访者，可取样时询问

 在平板 APP 中“粪便采集记录”模块

 扫入收集管条形码
 如果收集管未粘贴条码，访员请自行粘贴粪便样本的条码后扫入

 填写 APP 中的问题
 集中体检时可在收样结束后统一填写

 收集管竖立，常温保存，交给队伍专人保管
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粪便采样视频

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生物样本采集流程

2. 舌苔样本采集

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耗材——舌苔采样包

 套装内容：

• 样本收集管（含保存液）

• 采样拭子

• 说明书

• 外包装袋

 一次性无菌手套

 检查收集管上有无条形码

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舌苔采样要求和问题记录
在平板 APP “ 舌苔采集记录
 采样时间：集中体检当天早晨刷牙前
”模块中记录采样问题。问题
5 和 6 新增到个人问卷中。
 要求空腹、不刷牙、不漱口

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舌苔采样步骤

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舌苔采样步骤

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舌苔样本记录及保管

 平板 APP “ 舌苔采集记录”模块
 扫入舌苔采集管的条形码
 如果收集管未粘贴条码，访员请自行粘贴舌苔样本的
条码后扫入
 收集管竖立，常温保存，交给队伍专人保管

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舌苔采样视频

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生物样本采集流程

3. 尿液样本采集及试纸检测

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耗材——尿液培训
样本 耗材 包含元素 发放说明

尿液采 一次性尿杯、一次性吸管、样本收集管（含
样包 保存液）、一次性无菌手套、外包装袋
现场发放带盖尿杯和
尿液
一次性尿杯
尿液检 定制化尿液试纸、试纸定位比色板、船型尿
测套装 杯、带盖尿杯（单独包装）

尿液收集目的：
尿液中的微生物分析
尿液智能检测

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耗材——尿液采样包和检测套装
一次性尿杯 带盖尿杯
尿
液
采
样
包

尿液检测时纸巾、一次性无菌手套由项目组配备

尿
液
检
测
套
装

船形尿杯 尿液试纸筒 尿液试纸 试纸定位比色板

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尿液采样前——耗材分装与分发
一次性尿杯 带盖尿杯

 分装：
 从尿液采样套装中取出一次性尿杯，
单独存放。
 检查尿液样本收集管是否贴条形码
 如果收集管未粘贴条码，访员请
自行粘贴尿液样本的条码
集中体检时，现场发放给受
访者自行留取尿液  分发：
 每名受访者发放 1 个一次性尿杯和 1
个带盖尿杯
 用记号笔在带盖尿杯上写明受访者的
姓名和年龄

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尿样采集步骤
1. 准备好一次性尿杯、带盖尿杯和一次性手套。
2. 带上一次性手套，取出一次性尿杯，弃掉前段尿液，接
中段尿液 1 满杯（约 20ml ） ;
一次性尿杯
3. 打开带盖尿杯，把尿液倒入，拧紧杯盖。丢弃一次性尿
杯和剩余尿。
4. 把带盖尿杯交回收样人员。

带盖尿杯
 采样时间：体检当天空腹 8 小时后晨起第 1 次或第 2 次尿
 体检当天未留晨尿者：现场采集非空腹尿也可以
 对于频繁夜醒小便者：取早晨 5 点半至 7 点的尿
 采样要求：取中段尿一次性尿杯 1 杯（带盖尿杯约半杯）

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尿液采样记录

在平板 APP “ 尿液采集记录”模块中记录以上采样问题。

问题 4 新增到个人问卷中。

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尿液分装和记录

1) 带上一次性无菌手套 ;

2) 取出 1 根含有保存液的样本收集管；
带盖尿杯
3) 小心拧开含保存液的样本收集管 ;

4) 用滴管从带盖尿杯中吸取 2ml 尿液放入有保存液的收集管

5) 拧紧收集管盖子。 注意 : 请勿倾倒收集管。

6) 上下颠倒收集管 5 次，使尿液和保存液充分混匀。
7) 平板 APP “ 尿液采集记录”模块：扫入尿液采集管的条形码

8) 把收集管竖立，常温保存，交给队伍专人保管。

访员注意 : 排尿后半小时内完成分装操作

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尿液分装视频

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尿液试纸检测耗材准备
 准备材料：带盖尿杯剩余的尿液（至少 10ml ）、船形尿杯、定制化尿液试纸、试纸定位比色板、纸巾和一次性
手套

 检测时间：排尿后 2 小时内

 检测耗时：约 2 分钟 / 样本

尿液试纸筒

带盖尿杯 试纸定位比色板
船形尿杯 尿液试纸

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尿液检测步骤
 1 、带盖尿杯中的剩余尿液全部倒入船型尿杯；
 2 、从标签筒中取出试纸条，将试纸条所有的测试区迅速
完全浸入尿液中，保持 1~2 秒后将其取出。
 注意事项：
 不要用手摸试纸条的试剂块部分，防止污染。
 试纸条的试剂块部分应迅速完全浸入尿中，保持 1~2 秒再取出，不宜太短
或太长，以免影响测定。

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尿液检测步骤
 3 、将试纸条边缘沿着船型尿杯口轻轻擦拭，并用纸巾将
试纸条上残余尿液吸去。

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尿液检测步骤
 4 、试纸条从尿样标本中取出 60 秒后，放入试纸定位比
色板凹槽中，并用平板拍照记录。

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尿液检测——错误示范

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尿液试纸检测结果
 5 、照片上传系统后，实时返回检测结果。如果没有返回
结果，重新拍照上传。

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检测套装的储存条件
 试纸定位比色板
 干燥条件下保存

 尿液试纸 试纸定位比色板 尿液试纸筒 尿液试纸

 避免摇晃和震动。勿存于冰箱中。
 试纸条必须在原筒中保存，不得移去筒内的干燥剂，试纸条取出后
请立即使用，取出试纸条后立即盖紧。
 持续操作也需要每次取出试纸后，用盖子盖上试纸筒，请勿完全处
于敞开状态。因为空气中的水分和室内外光线都可能让试纸变性。

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尿液试纸检测视频

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生物样本运输流程

—— 粪便、舌苔、尿液

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生物样本保存、短途运输、邮寄

 粪便、舌苔、尿液样本储存、运输的温度要求：
 常温储存运输

 邮寄时间要求
访员注意：常温下，样本进入保存液
 村居采样结束后邮寄 储存的期限是 14 天。

 要求从村居内第一人采样完成开始算的 7 天之内寄出，统一由
指定快递公司运输至深圳华大生命科学研究院
 务必保证 5 天内寄到，如果偏远地区 5 天内不能寄到，需缩短
采样周期

采样周期（天） =14 天 - 邮寄路上天数

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邮寄信息记录——小程序
 扫样本采集管上的条形码
 村居送样人填写
 起送地点： ______ 省 ________ 县 / 区 ________ 村居
 起运时间： __ 月 __ 日 __ 时 __ 分【系统自动显示当时时
间】
 粪便： _______ 管
 舌苔： _______ 管
 尿液： _______ 管
 送样人姓名： _______
 深圳华大生么科学院样品接收人员填写
 到达日期： __ 月 __ 日 __ 时 __ 分【系统自动显示当时时间】
 备注： （若样品数量与记录不一致请记录收到的正确数量）
 接样人姓名： _______
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特殊情况下的生物样本采集

—— 粪便、舌苔、尿液

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入户采样
 采样对象：追访、行动不便、集中体检未参加或未采集样本
 采样流程和要求同集中体检
 尽量采集空腹、未刷牙时的尿液和舌苔
 如受访者时间不允许，可采集任意时段尿液和舌苔，在采集问题记录
中如实记录。
 采集舌苔前 30 分钟内尽量勿进食，勿喝水，勿吸烟，勿饮酒，勿嚼
口香糖，勿使用漱口水，勿清水漱口。
 若采集舌苔前进食，进食后勿刷牙，勿漱口，可喝水，进食或喝水后
间隔 30 分钟以上取样。

 样本采集后尽快装入采集管，间隔超过 30 分钟为无效样本。

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要点总结
 尿液和舌苔尽量在空腹、不刷牙时取样，保证取样量足够

 取样后尽快把样本放入收集管的保存液中（ 30 分钟内佳，在
空气中时间越短越好，重点监控尿样和粪便，超过 30 分钟，
样本不放入采集管，重新采样）， 2 小时内完成尿液检测。
 样本放入收集管后，尿液样本上下颠倒 5 次（粪便样本和舌苔
样本轻轻摇晃），收集管竖立放，保证样本没入收集液中。
 从村居内第一人采样完成开始算的 14 天之内，统一由指定快
递公司运输至深圳华大生命科学研究院

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其他相关培训内容

 系统操作
 APP ：采样问题记录、尿样检测

 小程序：物流信息

 人员分配、体检当天总体流程培训、耗材的处理

 操作练习

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 THE END

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