PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI
BLOK KELUHAN MUSCULOSKELETAL

Strepcococcus
Corinebacterium
Baktaeri Anaerob
 General Characteristics
of Streptococci
● Gram-positive spherical/ovoid cocci arranged in
long chains; commonly in pairs
● Non-spore-forming, nonmotile
● Can form capsules and slime layers
● Facultative anaerobes
● Do not form catalase, but have a peroxidase system
● Most parasitic forms are fastidious and require
enriched media
● Small, nonpigmented colonies
● Sensitive to drying, heat, and disinfectants

3
Classification of Streptococci Based on Hemolysis on
Blood Agar

Streptococci

Hemolysis on BA
– -hemolysis -hemolysis -hemolysis -hemolysis
Partial hemolysis
Green discoloration around the colonies
e.g. non-groupable streptococci (S.
pneumoniae & S. viridans)
– -hemolysis
Complete hemolysis
Clear zone of hemolysis around the colonies
e.g. Group A & B (S. pyogenes & S.
agalactiae)
– -hemolysis
No lysis
e.g. Group D (Enterococcus spp)
 Differentiation between
-hemolytic streptococci

● The following tests can be used to differentiate

between -hemolytic streptococci

○ Lanciefield Classification

○ Bacitracin susceptibility Test

■ Specific for S. pyogenes (Group A)

○ CAMP test

■ Specific for S. agalactiae (Group B)

 CAMP test

Bacitracin disc test

doc.Lia Arivin
 Optochin Susceptibility Test

Optochin resistant
S. viridans

Optochin susceptible
S. pneumoniae
 Difteri

Corynebacterium
Diphtheriae
 Corynebacterium

● Nonmotil, non capsulated, club-shaped

● Gram positive rod shaped bacillus
● Tumbuh subur apabila terdapat oksigen
● Reservoir manusia
● Penyebaran melalui pernapasan
● Reservoir manusia dengan penyebaran melalui pernapasan
● Virulensi toksin difteri (toksin A-B), ADP ribosil transferase mengikat EF-2
eukariotik, menghambat sintesis protein. Toksin B, mengarahkan toksin ke
mukosa orofaring, jantung dan sel saraf
● Gejala infeksi (difteri) adalah faringitis dengan pseudomembran putih kotor,
bull neck, limfadenitis servikalis, miokarditis, dlsfungsi jantung, dan
kelumpuhan saraf laringealis. Dapat terjadi kematian akibat obstruksi napas
atau gagal jantung.
● Pencegahan infeksi dengan vaksìnasi dengan toksin difteri
● Pengobatan dengan antitoksin dan antibiotik (eritromisin atau penisilin)
 Faktor virulensi
Corynebacterium Sp
● c. Diphteriae Diphteriae exotoxin
● c. Jeikeium antibiotik resistance
● C. Urealyticum antibiotic resistance, urease
production
● C. Psedotuberculosis Diphteria exotoxin:
phospholipase D
● C.Ulcerans Diphteria exotoxin ;
Phospholipase D

Phospholipase D: increse vascular permeability and promote spread of organism

 3 morphological types of C. diphtheria are
found on tellurite containing media :

1. Mitis – black colonies with a gray periphery

2. Gravis – large, gray colonies
3. Intermedius – small, dall gray to black.
All produce an immunologically identical toxin.
 Pewarnaan Granula Volutin
Pewarnaan
Pengamatan
Albert Neisser Gram

Bentuk Batang Batang Batang

Warna batang Biru Kehijauan Kuning coklat Ungu

Granula Ungu tua Biru tua/ungu -

Seperti huruf cina atau Tersebar
Susunan
membentuk huruf V, L, T
 Colony Characteristics
• Blood agar : small, granular and
gray with irregular edges ;
Hemolysis may or may no
present;
• Loeffler’s serum slope :
- very rapid growth
- colonies in 6-8 hrs
- initially circular white
opaque colonies and acquire
yellowish tint on incubation
 Hasil uji fermentasi pada media
glukosa-Sukrosa-Amilum

Bakteri Glu Suk Amylum

Corynebacterium diphtheriae - gravis + - +

Corynebacterium diphtheriae - mitis + - -
Corynebacterium diphtheriae-
intermedius + - -
Corynebacterium xerosis + + -
Corynebacterium pseudodiphteriricum - -
-
 Bakteri Anaerob

• Memanfaatkan jalur fermentative, tidak

memiliki superoksida dismutase dan katalase
• Anaerob obligat = mati oleh oksigen, hanya
memiliki jalur fermentative
• Anaerob aerotoleran = dapat toleransi oksigen,
tidak memiliki jalur aerobic
• Anaerob fakultatif =memiliki respirasi aerobic
dan fermentasi
 Anaerobes differ from
Aerobic Bacteria

● Anaerobes generate energy by fermentation

● Lack the capacity to utilize O2 as a terminal hydrogen
acceptor
● Some are sensitive to O2 concentration as low as 0.5% O2
● Most can survive in 3%-5% O2
● A few can grow poorly in the presence of air  aero tolerant
anaerobes
● Many are members of the normal flora
 created by presence of facultative
anaerobes
 The Requirements for Growth:
Related to Oxygen
● Oxygen (O2)

Aerobic and anaerobic bacteria can be identified by growing them in liquid culture:
1: Obligate aerobic (oxygen-needing) bacteria gather at the top of the test tube in order to absorb maximal amount of oxygen.
2: Obligate anaerobic bacteria gather at the bottom to avoid oxygen.
3: Facultative bacteria gather mostly at the top, since aerobic respiration is the most beneficial one; but, as lack of oxygen does not
hurt them, they can be found all along the test tube.
4: Microaerophiles gather at the upper part of the test tube but not at the top. They require oxygen but at a low concentration.
5: Aerotolerant bacteria are not affected at all by oxygen, and they are evenly spread along the test tube.
 Clostridium
● Salah satu jenis bakteri anaerob utama yang sering
menyebabkan infeksi muskuloskeletal
● Berbentuk batang anaerobik pembentuk spora
● Gram positif dengan diameter yang cukup besar
 Clostridium tetani
● Reservoir dan penularan, merupakan organisme pembentuk spora di tanah.
Implantasi traumatik ke dalam jaringan dengan oksigenasi rendah (misal, melalui
luka tusuk, luka bakar, bedah yang tidak steril, atau persalinan) menyebabkan
germinasi spora, pertumbuhan, dan pembentukan toksin.
● Reservoir dan penularan, pembentuk spora di tanah, implantasi traumatic ke dalam
jaringan dengan oksigenasi rendah
● Toksisitas, eksotoksin neurotoksik (tetanolisin dan tetanospasmin) yang
menghambat pelepasan glisin dan GABA, menyebabkan spasme otot (trismus,
lockjaw, risus sardonicus), dan paralisis otot besar (opistotonus/kaku pada
punggung), paralisis otot tenggorokan dan pernapasan
● Pengobatan menggunakan Imunoglobulln antitetanus (TIG), vaksin tetanus-difteri
aktif, DtaP atau DTP, Obat spasmolitik, Metronidazol atau penisilin
● Pencegahan dengan vaksin tetanus dan profilaksis luka.
CLOSTRIDIUM TETANI
Bakteri gram (+)
Anaerob
Bentuk Batang
Bergerak dan menghasilkan spora
berbentuk oval menyerupai raket
tenis
Tahan bertahun-tahun pada
lingkungan tertentu dan tahan
terhadap sinar matahari

Blood agar:
Swarming due
its motility
 Clostridium tetani
Patogenesis
Kontaminasi luka dengan spora C. Tetanus
Germinasi spora dan sel vegetatif bertumbuh
menghasilkan toksin (dalam keadaan anaerob)

Toksin :
1. Tetanolisin secara lokal merusak jaringan
sekitar infeksi
2. Tetanospasmin yang menyebabkan gejala
klinis Tetanus

● Pengobatan menggunakan Imunoglobulln antitetanus

(TIG), vaksin tetanus-difteri aktif, DtaP atau DTP,
Obat spasmolitik, Metronidazol atau penisilin
● Pencegahan dengan vaksin tetanus dan profilaksis
luka.
Manifestasi Klinis
TETANUS GENERALISATA
Bentuk yang paling sering terjadi
Tanda khas pertama
 Trismus (Lock Jaw) akibat peningkatan tonus M Masseter diikuti
dysphagia, kekakuan dan nyeri otot leher, bahu dan punggung
yang menyebabkan opistotonus.
 Kontraksi otot wajah menghasilkan ekspresi yang khas  Risus
Sardonicus.
 Kemudian terlibat otot abdomen
 Anggota gerak bawah, tangan dan kaki relatif jarang terlibat.
 Trismus

Risus
sardonicus
Opistotonus
 Clostridium perfringens

● Bakteri yang sering menyebabkan gangrene

(mionekrosis/gas gangrene) pada penderita
DM
● Spora Subterminal
● Diagnosis, ditemukan basil gram positif
dengan sedikit PMN
● Pengobatan, gas gangrene dengan
debridement serta pemakaian kamar
hiperbarik, antibiotic penisilin
dan klindamisin
● Keracunan makanan Cl. Perfringens,
menyebabkan diare sekretorik dengan kram
epigastrik akut 8-24 jam pc
 Clostridium perfringens
• Large gram-positive bacilli with stubby
ends
• Capsulated
• Non motile (C. tetani is motile)
• Anaerobic
• Grown quickly on selective media
• Can be identified by Nagler Reaction

Spora subterminal
Diagnosis Laboratorium

- Spesimen dari luka, pus dan jaringan

- Adanya sejumlah besar bakteri batang Garam (+) pd smear

menunjukkan adanya clostridium gas gangrene. Spora tidak selalu
ada bila dikultur secara invitro

- Spesimen ditanam pada chopped-meat glukosa agar dan LAD 

inkubasi secara anaerobik  koloni yg tumbuh dilakukan uji
biokimia, hemolisis dan bentuk koloni

- Aktivitas lesitihinase dievaluasi dengan adanya presipitasi

disekitar koloni pada agar egg yolk

- Identifikasi produksi toksin dengan netralisasi oleh apesifik

antitoksin
 Clostridium difficle

● Pertumbuhan berlebih di GI tract, sering

berkaitan dengan pemakaian antibiotic
● Toksin, polipeptida A (enterotoksin) dan B
(sitotoksin yang menyebabkan kelainan
sitoskeleton)
● Gejala infeksi, diare ringan sampai colitis
pseudomembran
● Pengobatan menggunakan metronidazol
● Molecular diagnosis for cl. Perfringens

○ Detection of phospholipase C (lecithinase Blood agar (anaerobically):

activity) gene PCR large, flat colonies with
barnyard smell
○ Detection of alpha, beta, epsilon and iota
toxin gene by multiplex PCR
 Spesimen pada
Infeksi Muskuloskeletal

• Spesimen yang digunakan untuk pemeriksaan bakteri pada infeksi

muskuloskelatal dapat berupa pus, usap Iuka, biopsi atau darah,
berdasarkan patogenesis masing-masing penyakit.
• Pemeriksaan bakteri yang dapat digunakan adalah pemeriksaan
mikroskopik, biakan dan uji kepekaan bakteri terhadap antibiotik,
pemeriksaan serologi dan molekuler.
• Pemeriksaan mikroskopis secara umum dilakukan melalui pewarnaan
Gram dan sediaan basah.
Jenis Spesimen
THANK YOU