‫رنگ آمیزی در باکتری شناسی‬

‫مطالعه ی گسترش رنگ آمیزی شده به عنوان سریع ترین روش در‬
‫تشخیص برخی از بیماری های عفونی‬
‫اهداف رنگ آمیزی‬
 ‫• نشان دادن میکروارگانیسم ها و سلولهای موجود در نمونه‬

‫• مشاهده ی اجزائی مانند فالژل‪ ،‬اسپور‪ ،‬کپسول‪ ،‬دانه های‬

‫متاکروماتیک‬

‫• تفکیک میکروارگانیسم ها بر اساس خواصی چون ساختمان‬

‫دیواره سلولی‬
‫مراحل رنگ آمیزی‬
‫تهیه گسترش ‪Smear preparation‬‬ ‫•‬
‫خشک کردن ‪Drying‬‬ ‫•‬
‫ثابت کردن ‪Fixation‬‬ ‫•‬
‫رنگ آمیزی ‪Staining‬‬ ‫•‬
1

2
3

4
‫• در ابتدا باید از باکتری بر روی الم گسترش تهیه‬
‫کرده و سپس رنگ آمیزی انجام می شود‪.‬‬

‫• طرز تهیه گسترش‪:‬‬

‫به وسیله حرارت دادن روی شعله‬
‫به وسیله استفاده از الکل‬
 ‫‪ .1‬تهیه گسترش‬
‫• از محیط مایع‪ ،‬جامد یا نمونه های بالینی‬

‫• محیط مایع‪ :‬تکان دادن لوله و برداشتن با لوپ‬

‫• محیط جامد‪ :‬یک قطره سرم فیزیولوژی و برداشت از کلنی‬
‫• نمونه بالینی‪:‬سواب ترشحات‪ ،‬آسپیره‬
‫• ‪ .2‬خشک کردن‪ :‬در دمای آزمایشگاه‬
‫• ‪ Fixation .3‬با حرارت یا متانول‬
‫• ‪ .4‬رنگ آمیزی‬
 ‫رنگ آمیزی های اختصاصی‬
‫‪ .1‬اسید فاست‪ :‬مایکوباکتریومها‬ ‫•‬
‫رنگ آمیزی منفی‪ :‬رنگ سیاه نیگرزین ‪Nigrisin‬‬ ‫•‬
‫رنگ آمیزی تاژک‪:‬‬ ‫•‬
‫اسید تانیک – فوشین قلیائی‬ ‫•‬
‫رنگ آمیزی کپسول‪ :‬روش ‪ Welch‬سولفات مس‬ ‫•‬
‫رنگ آمیزی نوکلئوید‪Feulgen :‬‬ ‫•‬
‫رنگ آمیزی اسپور‪ :‬ماالشیت گرین یا کربول فوشین‬ ‫•‬
‫رنگ آمیزی آلبرت‪ ،‬گرانول های فسفات‬ ‫•‬
 ‫رنگ آمیزی گرم‬
‫• مهمترین و متداول ترین رنگ آمیزی در باکتری‬
‫شناسی‬
‫• بر اساس این رنگ آمیزی باکتریها به دو گروه گرم‬
‫مثبت و گرم منفی تقسیم می شوند‬
‫• تفاوت مربوط به ساختمان دیواره سلولی می باشد‬
‫• در این رنگ آمیزی از رنگ‬
‫‪‬کریستال ویوله‬
‫‪‬محلول ید( لوگل)‬
‫‪‬الکل‬
‫‪‬رنگ سافرانین‬
‫استفاده می شود‪.‬‬
 ‫طریقه رنگ آمیزی‬

‫‪ 1‬دقیقه‬ ‫کریستال ویوله‬ ‫•‬

‫‪ 1‬دقیقه‬ ‫لوگل‬ ‫•‬
‫استون الكل ‪20‬تا‪ 30‬ثانیه‬ ‫•‬
‫‪ 2‬دقیقه‬ ‫سافرانین‬ ‫•‬
‫خشک کردن الم در هوا و بررسی با میکروسکوپ‬ ‫•‬