So sánh

N h óm 1

phương pháp

lên men
Nhóm 1
Nguyễn Mạnh Hoàng - 20210375

Bùi Thị Huyền Linh - 20211341

Phạm Thùy Vân - 20211393

Nguyễn Văn Vũ - 20211398

GVHD : PSG.TS.Lê Thanh Hà

Nội dung

Giới
Giớithiệu
thiệu
I1

II2 Phương
Phươngpháp
pháp

III Kết quả

 ơng pháp lê n me n A BE
Giới thiệu phư

• Xuất hiện từ đầu thế kỉ 20

• Năm 1970, cuộc khủng hoảng dầu mỏ thô  sự phát tiển

của ngành công nghệ sinh học

• Nhưng phương pháp hạn chế về kinh tế và khó cạnh tranh 1970
BioFlo 3000
 ơng pháp lê n me n A BE
Giới thiệu phư

• Chủng clostridium thường được sử dụng cho quá

trình lên men ABE

• Việc kiểm soát pH dóng một vai trò rất quan trọng
trong quá trình lên men ABE
 1 2 3
Các phương pháp lên Bacth Fed - Bacth Continuous A–B–E
fermentation.
mem A-B-E
 II.
Phương pháp
Phương pháp
1 Batch A–B–E fermentation

- Chủng vi khuẩn : C. acetobutylicum ATCC 824™

- CRM bao gồm các dung dịch sau :
+ Dung dịch I : 60 g glucose 2 Fed-batch A–B–E fermentation
+ Dung dịch II: 5 g chiết xuất men
+ Dung dịch III: 0,75 g KH2PO4, 0,75 g K2HPO4, 2 g
(NH4)2SO4, 1 g NaCl Continuous A–B–E fermentation.
3
+ Dung dịch IV: 0,2 g MgSO47H2O, 0,01 g MnSO4H2O,
0,01 g FeSO47H2O
+ Dung dịch V: 0,5 g L-cysteineHCl
4 Analytical methods
Batch A–B–E Fermentation

- Thiết bị : BioFlo 3000 Biore-actor

- Độ pH duy trì : 4.5
- Nhiệt độ : 37 °C

- Nitơ có độ tinh khiết cực cao được

phép chảy qua khoảng trống phía trên
của thiết bị lên men

- Quá trình lên men hàng loạt được bắt

đầu bằng cách chuyển 2% chất cấy vào
thiết bị lên men có chứa CRM
 Fed-batch A–B–E fermentation
- Thiết bị : BioFlo 3000 Biore-actor
- Độ pH duy trì : 4.5
- Nhiệt độ : 37 °C

- Chạy ở chế độ batch trong 21h đầu với thể tích ban đầu là 330 mL. Sau đó
chạy ở chế độ fed-batch trong 12h tiếp theo với tốc độ cấp dưỡng là 66 mL/h.
Từ 33h trở đi chạy tiếp ở chế độ batch.

- Môi trường chứa đúng lượng chất dinh dưỡng như CRM, ngoại trừ nồng độ
glucose là 85 g/L. Nha đam
Continuous A–B–E fermentation

- Thiết bị : BioFlo 3000 Biore-actor

- Độ pH duy trì : 4.5
- Nhiệt độ : 37 °C

- Chạy ở chế độ batch trong 21h. Sau 21h, bắt đầu cấp dưỡng (thành phần
môi trường như chế độ fed-batch). Thể tích dich lên men được giữ có
định bằng cách cài đặt tốc độ dòng ra bằng tốc độ dòng cấp dưỡng.
 Analytical methods
- Mật độ tế bào được đo ở bước sóng 540nm bằng máy đo quang phổ
BioMate™ 3

- Nồng độ glucose được đo bằng Máy phân tích sinh hóa YSI 2700

- Acetone, eth-anol, butanol, axit axetic và axit butyric trong dung dịch nuôi
cấy lên men được phân tích bằng sắc ký khí (GC) sử dụng cột mao quản
DB-FFAP và máy dò FID

YSMa
Bio 003
I 27te™
 III.
Kết quả
 Batch A–B–E fermentation
Fed-Batch A–B–E fermentation
III. Kết quả
2

Batch A–B–E fermentation Performance

 Batch A–B–E fermentation

- Tỉ lệ thể tích dịch glucose là 1,62 g/L/h, trong đó tổng

lượng glucose lên men là 63,3 g

- Sản lượng dung môi và butanol lần lượt là 0,52 và 0,37

g/L/h

- Khi độ pH được kiểm soát ở mức 4.5 thì hiệu suất dung
môi và butanol lần lượt là 0,35 và 0,24 (g/g-glucose)

- Nếu không kiểm soát độ pH, hiệu suất và hiệu suất dung
môi thấp hơn đáng kể
 Fe d -B atc h A – B –E fe rm e ntati o n

- Nồng độ butanol ban đầu giảm xuống và sau đó duy trì ở

mức 4,8 g/L cho đến khi ngừng cấp nguyên liệu.

- khi nồng độ butanol tăng sau 33 giờ thì nồng độ sinh khối
cũng như nồng độ axit giảm xuống

- tốc độ tiêu thụ glucose giảm đáng kể ở 43 giờ khi nồng

độ butanol đạt đến nồng độ ngưỡng 12 g/L

- Tỉ lệ thể tích dịch glucose là 1,59 g/L/h, trong đó tổng

lượng glucose lên men là 75,8 g
 Continuous A –B –E fe rme ntati o n

- Quá trình lên men được chạy ở chế độ Batch trong 26h
đầu. Sau khi chuyển từ quá trình tạo axit sang quá trình
tạo dung môi, quá trình lên men được chuyển sang chế
độ liên tục. Tuy nhiên sau 190h đầu, quá trình vẫn chưa
thể đạt được trạng thái ổn định bởi vì các vấn đề liên
quan đến năng lượng và nhiệt độ. Sau đó, quá trình lên
men đạt được 4 trạng thái ổn định với 4 tỉ lệ pha loãng
lần lượt là 0.13, 0.2, 0.17, 0.1 . Tất cả nồng độ của sinh
khối, lượng glucose tiêu thụ và các chất chuyển hóa chủ
yếu được thể hiện trong Bảng 1. Bắt đầu từ giờ thứ 336,
xuất hiện trạng thái suy giảm nồng độ dung môi. Quá
trình lên men vẫn có thể đạt được trạng thái ổn định
khác trong quá trình suy giảm dung môi, khi vẫn có thể
tại ra lượng thấp dung môi ở tỉ lệ pha loãng 0.13 . Tuy
nhiên lượng butanol và sinh khối đang có không thể tiếp
tục quá trình lên men khi chuyển sang chế độ batch. Điều
này cho thấy sự suy giảm dung môi không chỉ làm mất
khả khả tạo dung môi mà còn phá vỡ trạng thái sinh
trưởng bình thường.
Continuous A –B –E fe rme ntati o n
 P erf ormanc e of c ontinuous
- Ở tỉ lệ pha loãng thấp, quá trình lên men chủ yếu tạo
dung môi trong khi ở tỉ lệ pha loãng cao chủ yếu tạo ra
acids
- Ở tỉ lệ dung môi/acid < 1, tỉ lệ dịch glucose được tiêu thụ
là lớn hơn so với ở tỉ lệ dung môi/acid > 1
- Sản lượng dung môi cao nhất là ở D = 0.1 , tại đó tỉ lệ
Butanol/Dung môi chiếm tới 94%
- Cuối quá trình lên men, tỷ lệ dung môi thu được thường
là Axeton: Butanol: Etanol = 3: 6: 1. Nếu kiểm soát độ pH
ở 4.5, thậm chí còn tạo ít etanol hơn nữa.
 Conclusions
- Xét về hiệu suất tạo dung môi, batch là quá trình tạo ra
cao nhất
- Xét về hiệu suất và sản lượng butanol, continuous là quá
trình tạo ra cao nhất. Vì vậy nên áp dụng độ pha loãng
thấp cho quá trình liên tục
- Chế độ Fed-batch không nên dung cho quá trình tạo
dung môi.
- Cuối cùng, nếu muốn thu được tỉ lệ butanol cao nhất,
việc kiểm soát độ pH ở 4.5 là rất quan trọng.
Công ty MDM Ngày 1 tháng 6 năm 2021

Tâm trí cũng giống như cơ

bắp - bạn rèn luyện nó càng
nhiều, nó sẽ càng mạnh mẽ
và phát triển hơn.

Idowu Koyenikan
Công ty MDM Ngày 1 tháng 6 năm 2021

Cảm
ơn!
Chúc bạn
một ngày tốt
lành.
Công ty MDM Ngày 1 tháng 6 năm 2021

Tài nguyên 1 2 3

Biểu tượng và
Hình minh họa
Hãy sử dụng những biểu tượng cũng như hình minh họa miễn phí
và có thể thay màu này trong thiết kế Canva của bạn. Thêm ý tưởng của Thêm ý tưởng của Thêm ý tưởng của Thêm ý tưởng của
bạn ở đây bạn ở đây bạn ở đây bạn ở đây