Gradu Amaierako Lana

Biologia Gradua

ZORROTZAURREN 2014KO LUR-

MUGIMENDUEK Crassostrea gigas OSTRENGAN IZAN DUTEN ERAGINAREN
AZTERKETA HISTOLOGIKOA
Zoologia eta Animalia Biologia Zelularra Saila
Egilea: Maialen Uriarte Alegria
Zuzendariak: Manu Soto Lopez
Beñat Zaldibar Aramburu
AURKIBIDEA

SARRERA

HELBURUAK

MATERIAL ETA METODOAK

EMAITZAK

ONDORIOAK
SARRERA

Zorrotzaurre uhartea
K: zakatzak

D: gonadak

E: hestea

F: urdaila

G: gibela
 HELBURUA

Lur-mugimenduek Deustuko kanaleko ur eta sedimentu-dinamikan, eta

Ostrak
batez ere, bertan bizi diren organismoen osasun-mailan izan duten
behale…

eragina aztertzea.
AURRETIK ONDOREN
Zakatzen lamelak fusionatu gabe. Zakatzen lamelak fusionatuta.

Gonaden garapen egokia. Gonaden garapen desegokia.

Digestio-guruineko atrofia-maila baxua. Digestio-guruineko atrofia-maila altuagoa.

Hauspeakin beltzen (metalen) metaketa urria. Hauspeakin beltzen (metalen) metaketaren emendioa.
MATERIAL ETA METODOAK

1
OSTREN LAGINKETA

Deustuko kanalaren irudia, 1 eta 2 laginketa-puntuak markatuta

dituelarik.
 2 ORGANO GUZTIAK HARTZEN DITUEN 5MM-KO ZEHAR
EBAKIAK EGIN ETA PARAFINA BLOKEAK PRESTATU (Leica
ASP 300).

DISEKZIOAK ETA LAGINEN

LEICA RM 212SRT MIKROTOMOAN 5μM-KO EBAKIAK EGIN

PROZESAMENDUA ETA PORTAK PRESTATU.

HEMATOXILINA-EOSINA AUTOMETALOGRAFIA
TINDAKETA EGIN (Leica TINDAKETA EGIN (Silver
Autostainer XL, Leica CV Enhancement Kit for LM
5030). and EM).
 GARAPEN-MAILA BALOREA DEFINIZIOA

3
Sexualki desberdindu gabe
Garapen goiztiarra
Erdiko garapena
Garapen berantiarra
1 Gonada-ehun gutxi edo bat ere ez.
2 Folikuluak zabaltzen hasiak.
3 Folikuluak zabalduta eta fusionatzen hasiak; ez gameto heldurik.
4 Folikuluak zabalduta eta fusionatuta, baina ehun-konektibo nahikoa
presente; zenbait gameto heldu.

Garapen osoa 5 Gameto gehienak helduta; ehun-konektibo gutxi geratu.

Errunaldia 6 Gametoak gonoduktuetan behatu.
Arrautzak 7 Oso gameto gutxi; zenbait gameto heldu oraindik presente; berritutako
ugaltze-jardueraren ebidentzia.
Hematoxilina-eosinaz
Arrautzak 8 Gametorik ez edo gameto gutxi behatu; gonada-ehuna atrofiatzen.
tindatutako laginak…
LAGINEN BEHAKETA ETA Gonaden garapen-mailaren identifikaziorako taula (Khafage et al., 2019).
ANALISI
HISTOPATOLOGIKO ATROFIA-MAILA DEFINIZIOA

OROKORRA (Olympus BX- 0 Ia tubulu guztien hormek lodiera normala (%0 atrofia); lumena ez da ia ikusten; tubulu batzuek hormaren
lodiera normala baino pixka bat txikiagoa.
51) 1 Batez besteko hormaren lodiera normala baino txikiagoa baina lodiera erdia baino handiagoa; tubulu
gehienek atrofia apur bat erakusten dute; tubulu batzuk oraindik normal.

2 Hormaren lodiera arruntaren erdia erakusten duten tubulu atrofiatuak.

3 Hormaren lodiera arrunta baino txikiagoa; tubulu gehienak nahiko atrofiatuta; horma batzuk oso meheak.

4 Horma oso meheak (%100 atrofia); ia tubulu guztiak atrofiatuta.

Atrofia-mailaren identifikaziorako taula (Kim et al., 2006).

 4 5
Autometalografia bitartez tindatutako
laginak… Porta guztiei…
ZILAR HAUSPEAKIN BELTZEN ARGAZKIAK (Olympus BX-51
DENTSITATE BOLUMETRIKOAREN mikroskopioa, NIS Elements)
KUANTIFIKAZIOA (Leitz Laborlux S,
BMS, SPSS PC)
 Excel eta SPSS programak

6
Esangarritasun-maila p<0,05
KRUSKAL-WALLIS TESTA

GONADEN-GARAPEN MAILA eta

ATROFIA-MAILA: datu ez-parametrikoak

WILCOXON-MANN-WHITNEY TESTA
ANALISI

ESTATISTIKOAK
- NORMALTASUN ANOVA
ZILAR HAUSPEAKIN DATUEN
NORMALIZAZIOA Datu normal eta PROBA (Shapiro- BAI
BELTZEN DENTSITATE homogeneoak?
(Transformazio Wilk)
BOLUMETRIKOAREN
- HOMOGENIZITATE
logaritmikoa)
KUANTIFIKAZIOA: datu
PROBA (Levene)
parametrikoak DUNCAN
PROBA
 EMAITZAK
Zakatzen lamelek ohiko egoera.
ZAKATZEN LAMELEN FUSIOA

ID. puntuan hartutako ostren zakatzak non lamelen fusioa ez den eman; KZ puntuan hartutako ostraren zakatzak non lamelen fusioa ez den eman;
handipena x40. handipena x40.
GONADAREN GARAPEN-MAILA
Gonaden garapen egokia.

GONADAREN GARAPEN-MAILA
6 b b

Gonaden garapen-mailaren balioak

4

a
2 a

0
1 2 3 4
KZ puntuan hartutako gonaden garapen-maila goiztiarra duen ostra; handipena x20. ID puntuan hartutako gonaden garapen-maila osoa duen ostra emea; handipena x20.
IGESTIO-GURUINEKO ATROFIA-MAILA

Atrofia-mailan ez aldaketa esangarririk.

ATROFIA-MAILA
3

a
2 b b

Atrofia-maila
a

0
1 2 3 4
ID puntuan hartutako atrofia-maila baxuko ostra; handipena x20. KZ puntuan hartutako atrofia-maila baxuko ostra; handipena x20.
SPEAKIN BELTZEN METAKETA
Metalen metaketaren emendioa, baina igoera txikia.
VV BSD
4 b b

Dentsitate Bolumetrikoa (x100000)

3

0
1 2 3 4
ID puntuan hartutako ostra non zilarrezko hauspeakin beltzak nagusiki xafla KZ puntuan hartutako ostra non zilarrezko hauspeakin beltzak nagusiki xafla
basalean hemozitoetan eta liseri-epitelioan kokatzen diren; handipena x20. basalean eta hemozitoetan kokatzen diren; handipena x20.
 ONDORIOAK
• Digestio-guruineko • Gonaden garapen egokia eta • Zakatzen lameletan ez da
dibertikuluen epitelioaren ohikoa eman da. fusiorik eman edo nekrosia
Ezin daiteke esan lur-mugimenduek,
lodiera ez da txikitu, ez da areagotu.
lur hauek kasu askotan jatorri
atrofiarik egon.
industriala edukirik, Deustuko
kanaleko ur eta sedimentu-
dinamikan eta baita bertan bizi diren
organismotan ondoriorik dutenik.

PROPOSAMENA: epe-
luzeagora laborategi • Digestio-guruinean metalen
metaketaren emendioa
esperimentu zehatzago,
estatistikoki esangarria da,
sakonago eta zabalagoak baina igoera hori, nahiz eta

egitea. esangarria izan, txikia da.

ESKERRIK ASKO.
GALDERARIK?