Punim seminarik në lëndën

Mikrobiologji klinike

Tema: Metoda PCR

Mentorja e lendës: Punoi: Anesa Binaku dhe

Dr.Dea Dervishi Leonita Kicaj

Prishtinë, 2023
Objektivat
• Hyrje
• Taq polymerase
• Primerët e PCR
• Hapat e PCR
• Aplikimet e PCR
 Hyrje
• Reaksioni i zinxhirit polimeraz (PCR) është një metodë e përdorur

gjerësisht në biologjinë molekulare për të bërë shumë kopje të një

segmenti të ADN-së specifike.

• Duke përdorur PCR, kopjet e sekuencave të ADN-së amplifikohen

në mënyrë eksponenciale për të gjeneruar mijëra e miliona kopje të

tjera të segmentit të veçantë të ADN-së.

• PCR tani është një teknikë e zakonshme dhe shpesh e

domosdoshme e përdorur në laboratorin mjekësor dhe hulumtimet

laboratorike klinike për një larmi aplikacionesh, duke përfshirë

hulumtimin biomjekësor po ashtu ne zbulimin e krimeve ne

kriminalistik.
Polimeraza Taq
• Ashtu si riprodhimi i ADN-së në një organizëm, PCR kërkon një enzimë polimerazë
të ADN-së që krijon vargje të reja të ADN-së, duke përdorur fijet ekzistuese si
shabllone. Polimeraza e ADN-së e përdorur zakonisht në PCR quhet polimeraza
Taq, sipas bakterit tolerant ndaj nxehtësisë nga i cili u izolua (Thermus aquaticus).
• T. aquaticus jeton në burime të nxehta dhe kanale hidrotermale. Polimeraza e saj
e ADN-së është shumë e qëndrueshme ndaj nxehtësisë dhe është më aktive
përreth 70 C një temperaturë në të cilën një polimerazë e ADN-së njerëzore ose E.
coli do të ishte jofunksionale). Ky qëndrueshmëri ndaj nxehtësisë e bën Taq
polimerazën ideale për PCR. Siç do ta shohim, temperatura e lartë përdoret në
mënyrë të përsëritur në PCR për të denatyruar ADN-në e shabllonit, ose për të
ndarë fijet e saj.
Primerët e PCR
Hapat e PCR
Real time-PCR
Faleminderit!