Module 3 Diagnosis DRTB Update VIE

Xét nghiệm chẩn
đoán lao nhanh
CHIANG Chen-Yuan MD,

MPH, DrPhilos
Khuyến cáo sử dụng Xpert MTB/RIF như là xét nghiệm chẩn đoán ban đầu ở
người trưởng thành và trẻ em nghi lao phổi
1. Ở người lớn có các dấu hiệu và triệu chứng của bệnh lao phổi, cần sử dụng Xpert
MTB/RIF làm xét nghiệm chẩn đoán ban đầu để phát hiện bệnh lao và kháng
rifampicin trên mẫu bệnh phẩm đờm thay vì soi/nuôi cấy và DST kiểu hình.
(Khuyến cáo mạnh mẽ, độ chắc chắn cao của bằng chứng về độ chính xác của xét
nghiệm; độ chắc chắn vừa phải của bằng chứng cho các kết quả quan trọng của
bệnh nhân)
2. Ở trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng của bệnh lao phổi, cần sử dụng
Xpert MTB/RIF làm xét nghiệm chẩn đoán ban đầu để phát hiện lao và
kháng rifampicin trên mẫu bệnh phẩm đờm, chọc hút dạ dày, hút mũi họng
và phân thay vì soi/nuôi cấy và DST kiểu hình. (Khuyến cáo mạnh mẽ, độ
chắc chắn vừa phải về độ chính xác trong đờm; độ chắc chắn thấp của
bằng chứng về độ chính xác xét nghiệm trong chọc hút dạ dày, hút dịch hầu
họng và phân)
Cập nhật hướng dẫn chẩn đoán, xét nghiệm nhanh chẩn đoán lao của TCYTTG (Module 3). 2021
(CRS: tiêu chuẩn tham chiếu tổng hợp; MRS: tiêu chuẩn tham chiếu vi sinh)
Xét nghiệm Xpert MTB/RIF Ultra
• xét nghiệm Xpert Ultra kết hợp hai gen đích khuếch đại đa bản khác
nhau (IS6110 và IS1081) và có buồng phản ứng DNA lớn hơn Xpert
MTB / RIF (PCR 50 μL ở Xpert Ultra so với 25 μL trong Xpert MTB / RIF)
Xét nghiệm Xpert MTB/RIF Ultra
• Xpert Ultra có giới hạn phát hiện 16 đơn vị hình thành khuẩn lạc của vi khuẩn
(cfu) trên mỗi mililit (so với 114 cfu / mL đối với Xpert MTB / RIF).
• Việc sử dụng phân tích nhiệt độ nóng chảy cho phép Ultra phân biệt tốt hơn các
đột biến im lặng với các đột biến khác qua bốn đầu dò xác định các đột biến
kháng rifampicin trong vùng xác định kháng rifampicin của gen rpoB bằng cách
phát hiện sự thay đổi nhiệt độ nóng chảy phân biệt với giá trị tham chiếu của
chủng hoang dã
• Kết quả dạng “vết” xác định mẫu có đoạn IS6110/IS1081 nhưng rpoB âm
tính.
GLI 2017, Chakravorty 2017

Xét nghiệm Xpert MTB / RIF Ultra phát hiện Vi khuẩn lao và kháng
rifampicin
Dorman S.E. Lancet Infect Dis 2018

Xét nghiệm Xpert MTB / RIF Ultra phát hiện Vi khuẩn lao và
kháng rifampicin
Dorman E. Lancet Infect Dis 2017

Xét nghiệm Xpert MTB / RIF Ultra phát hiện Vi khuẩn lao
và kháng rifampicin
Dorman E. Lancet Infect Dis 2017

Khuyến cáo về Xpert Ultra làm xét nghiệm ban đầu ở người lớn và trẻ em có
các dấu hiệu và triệu chứng nghi bệnh lao phổi
3. Ở người lớn có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi và không có tiền sử lao trước đó
(≤5 năm) hoặc có tiền sử điều trị lao >5 năm kể từ khi kết thúc điều trị, Xpert Ultra nên
được sử dụng như một xét nghiệm chẩn đoán lao ban đầu và để phát hiện kháng
rifampicin ở mẫu bệnh phẩm đờm, thay vì soi/nuôi cấy và DST kiểu hình. (Khuyến cáo
mạnh mẽ, độ chắc chắn cao của bằng chứng cho độ chính xác của xét nghiệm)
4. Ở người lớn có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi và có tiền sử bệnh lao trước đó
và kết thúc điều trị trong vòng 5 năm qua, Xpert Ultra có thể được sử dụng như một xét
nghiệm chẩn đoán lao ban đầu và để phát hiện kháng rifampicin ở mẫu bệnh phẩm đờm,
thay vì soi/nuôi cấy và DST kiểu hình. (Khuyến nghị có điều kiện, độ chắc chắn thấp của
bằng chứng về độ chính xác của xét nghiệm)
( MRS: tiêu chuẩn tham chiếu vi sinh)
( MRS: tiêu chuẩn tham chiếu vi sinh)
Khuyến cáo về Xpert MTB/RIF và Xpert Ultra làm xét nghiệm ban đầu ở người
lớn và trẻ em có dấu hiệu và triệu chứng nghi lao ngoài phổi
6. Ở người lớn và trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng của lao màng não, nên sử dụng Xpert
MTB/RIF hoặc Xpert Ultra dịch não tủy (CSF) như một xét nghiệm chẩn đoán ban đầu cho lao
màng não do thay vì soi/nuôi cấy. (Khuyến nghị mạnh mẽ, độ chắc chắn vừa phải của bằng
chứng về độ chính xác của xét nghiệm Xpert MTB / RIF; độ chắc chắn thấp của bằng chứng về
độ chính xác của xét nghiệm Xpert Ultra)
7. Ở người lớn và trẻ em có dấu hiệu và triệu chứng nghi lao ngoài phổi, có thể sử dụng Xpert
MTB/RIF ở bệnh phẩm chọc hút hạch bạch huyết, sinh thiết hạch bạch huyết, dịch màng
phổi, dịch màng bụng, dịch màng ngoài tim, dịch hoạt dịch hoặc mẫu nước tiểu là xét nghiệm
chẩn đoán ban đầu lao ngoài phổi thay vì soi/nuôi cấy vi mô. (Khuyến cáo có điều kiện, độ
chắc chắn vừa phải của bằng chứng về độ chính xác xét nghiệm đối với dịch màng phổi; độ
chắc chắn thấp đối với chọc hút hạch bạch huyết, dịch màng bụng, dịch hoạt dịch, nước tiểu;
độ chắc chắn rất thấp đối với dịch màng ngoài tim, sinh thiết hạch bạch huyết)
Khuyến cáo về Xpert MTB/RIF và Xpert Ultra làm xét nghiệm ban đầu ở người
lớn và trẻ em có dấu hiệu và triệu chứng nghi lao ngoài phổi
8. Ở người lớn và trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao ngoài phổi, Xpert Ultra
có thể được sử dụng trong chọc hút hạch bạch huyết và sinh thiết hạch bạch huyết
như là xét nghiệm chẩn đoán ban đầu cho bệnh lao hạch bạch huyết thay vì soi /nuôi
cấy phết tế bào. (Khuyến nghị có điều kiện, độ chắc chắn thấp của bằng chứng)
9. Ở người lớn và trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao ngoài phổi, nên sử
dụng Xpert MTB/RIF hoặc Xpert Ultra để phát hiện kháng rifampicin thay vì nuôi cấy
và DST kiểu hình. (Khuyến nghị mạnh mẽ, độ chắc chắn cao của bằng chứng về độ
chính xác Xpert MTB / RIF; độ chắc chắn thấp của bằng chứng cho xét nghiệm Xpert
Ultra)
10. Ở người lớn và trẻ em dương tính với HIV có các dấu hiệu và triệu chứng của bệnh
lao lan tỏa, có thể sử dụng Xpert MTB/RIF trên mẫu bệnh phẩm máu, như một xét
nghiệm chẩn đoán ban đầu. (Khuyến nghị có điều kiện, độ chắc chắn rất thấp của
bằng chứng về độ chính xác của xét nghiệm )
What is the diagnostic accuracy of Xpert Ultra for extrapulmonary TB in adults,
as compared with MRS and CRS?
Khuyến cáo lặp lại xét nghiệm Xpert MTB/RIF và Xpert Ultra ở người lớn và
trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi
11. Ở người lớn có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi có kết quả vết Xpert Ultra trong xét
nghiệm ban đầu, không lặp lại với Xpert Ultra. (Khuyến nghị có điều kiện, độ chắc chắn rất
thấp của bằng chứng về độ chính xác của xét nghiệm )
12. Ở trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi ở những nơi có xác suất xét nghiệm
ban đầu dưới 5% và kết quả âm tính với XPERT MTB/RIF trong xét nghiệm ban đầu, không lặp
lại với Xpert MTB/RIF trong đờm, dịch dạ dày, chọc hút mũi họng hoặc phân. (Khuyến cáo có
điều kiện, độ chắc chắn thấp của bằng chứng về độ chính xác xét nghiệm đối với đờm và rất
thấp đối với các loại mẫu khác)
13. Ở trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi ở những nơi có xác suất xét nghiệm
ban đầu từ 5% trở lên và kết quả âm tính với Xpert MTB/RIF trong xét nghiệm ban đầu, có
thể lặp lại xét nghiệm Xpert MTB/RIF (hai xét nghiệm) ở mẫu đờm, dịch dạ dày, chọc hút mũi
họng và phân. (Khuyến cáo có điều kiện, độ chắc chắn thấp của bằng chứng về độ chính xác
xét nghiệm đối với đờm và rất thấp đối với các loại mẫu khác)
Khuyến cáo lặp lại xét nghiệm Xpert MTB/RIF và Xpert Ultra ở người lớn và
trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi
14. Ở trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi ở những nơi có xác suất xét
nghiệm ban đầu dưới 5% và kết quả Xpert Ultra âm tính trong xét nghiệm ban đầu,
không lặp lại xét nghiệm Xpert Ultra ở mẫu chọc hút đờm hoặc vòm họng. (Khuyến
cáo có điều kiện, độ chắc chắn rất thấp của bằng chứng về độ chính xác của xét
nghiệm )
15. Ở trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi ở những nơi có xác suất xét
nghiệm ban đầu 5% trở lên và kết quả Xpert Ultra âm tính trong lần xét nghiệm ban
đầu đầu tiên, lặp lại một xét nghiệm Xpert Ultra (hai xét nghiệm) ở mẫu chọc đờm và
vòm họng. (Khuyến cáo có điều kiện, độ chắc chắn rất thấp của bằng chứng về độ
chính xác của xét nghiệm )
Khuyến cáo về Xpert MTB/RIF và Xpert Ultra là xét nghiệm chẩn đoán ban đầu
lao phổi ở người lớn trong dân số nói chung có dấu hiệu và triệu chứng nghi
lao phổi hoặc chụp X-quang ngực với các bất thường về phổi hoặc cả hai
16. Ở người lớn trong dân số nói chung có các dấu hiệu hoặc triệu chứng nghi lao hoặc
chụp X-quang ngực có bất thường về phổi hoặc cả hai, Xpert MTB/RIF hoặc Xpert
Ultra có thể thay thế nuôi cấy là xét nghiệm ban đầu để phát hiện bệnh lao phổi.
(Khuyến cáo có điều kiện, độ chắc chắn thấp của bằng chứng về độ chính xác xét
nghiệm Xpert MTB / RIF và độ chắc chắn vừa phải cho Xpert Ultra)
17. Ở người lớn trong dân số nói chung có triệu chứng nghi lao hoặc chụp X-quang ngực
có bất thường ở phổi hoặc cả hai, sử dụng một xét nghiệm Xpert Ultra thay vì hai xét
nghiệm Xpert Ultra chẩn đoán bệnh lao phổi. (Khuyến cáo có điều kiện, độ chắc
chắn rất thấp của bằng chứng về độ chính xác của xét nghiệm)
Xét nghiệm Truenat MTB và MTB Plus
• Xét nghiệm Truenat MTB và MTB Plus - xét nghiệm phát hiện kháng rifampicin
(Truenat MTB-RIF Dx) (Molbio Diagnostics, Ấn Độ) sử dụng micro-PCR thời gian thực
để phát hiện M. tuberculosis và kháng rifampicin trong DNA được chiết xuất từ mẫu
đờm của bệnh nhân.
• Xét nghiệm sử dụng các thiết bị tự động, chạy bằng pin, khuếch đại và xác nhận sự
hiện diện của các locus DNA cụ thể, cho phép chẩn đoán nhanh chóng lao với đầu
vào tối thiểu của người dùng.
• Các sản phẩm này được thiết kế để vận hành trong các phòng thí nghiệm ngoại vi
với cơ sở hạ tầng tối thiểu và các kỹ thuật viên chỉ được đào tạo tối thiểu có thể dễ
dàng thực hiện các xét nghiệm này thường xuyên tại cơ sở của họ và báo cáo kết
quả trong vòng chưa đầy 1 giờ.
• Với các thiết bị này, xét nghiệm PCR lần đầu được sử dụng tại chỗ tại thực địa
• Roche Diagnostics (Roche) có hai xét nghiệm NAAT: xét nghiệm MTB cobas® để phát hiện Mtb và
cobas® MTB-RIF / INHassay để phát hiện kháng thuốc (rifampicin và isoniazid). Xét nghiệm MTB
cobas phát hiện cả gen RNA ribosome (rRNA) và gen esx 16S làm gen đích để phát hiện Mtb. LoD
được công ty báo cáo cho xét nghiệm này là 7,6–8,8 cfu / mL. Kháng rifampicin được phát hiện
bằng cách sử dụng kháng RRDR và isoniazid bằng cách sử dụng vùng khuyến khích inhA và gen katG.
Có nên sử dụng NAAT tự động có độ phức tạp vừa phải trên các mẫu hô hấp ở
những người có dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi để phát hiện bệnh lao
phổi, so với nuôi cấy không?
• Độ nhạy tổng thể trong 29

nghiên cứu dao động từ
79% đến 100% và độ đặc
hiệu từ 60% đến 100%.
• Phân tích gộp: Độ nhạy là
93,0% (CI 95%: 90,9–
94,7%) và độ đặc hiệu là
97,7% (CI 95%: 95,6–
98,8%).
những người có dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi để phát hiện kháng
rifampicin, so với DST kiểu hình dựa trên nuôi cấy không?
• Độ nhạy trong 18 nghiên

cứu này dao động từ 88%
đến 100% và độ đặc hiệu
từ 98% đến 100%.
• Phân tích gộp: Độ nhạy là
96,7% (CI 95%: 93,1–
98,9% (CI 95%: 97,5–
99,5%).
những người có dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi để phát hiện kháng
isoniazid, so với DST kiểu hình dựa trên nuôi cấy không?
• Độ nhạy trong 18 nghiên

cứu này dao động từ
58% đến 100% và độ
đặc hiệu từ 94% đến
100%.
• Phân tích gộp: Độ nhạy
là 86,4% (CI 95%: 82,1–
99,8% (CI 95%: 98,3–
99,8%).
Các xét nghiệm chẩn đoán ban đầu để chẩn đoán bệnh lao mà không phát hiện
kháng thuốc: Khuếch đại đẳng nhiệt qua trung gian vòng lặp (TB-LAMP)
• Bộ công cụ phát hiện vi khuẩn lao Loopamp™

Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) (Công ty
Hóa chất Eiken, Tokyo, Nhật Bản), dựa trên phản ứng
khuếch đại đẳng nhiệt qua trung gian vòng lặp (LAMP).
• một xét nghiệm thủ công cần ít hơn 1 giờ để thực hiện và có thể
đọc bằng mắt thường dưới ánh sáng tia cực tím
Ba bước thực hiện:
• Chuẩn bị mẫu - vi khuẩn được xử lý nhiệt để bất hoạt và ly giải
(chiết xuất DNA).
• Khuếch đại - mẫu được đặt trong một khối gia nhiệt ở 67 ° C
(enzyme polymerase khuếch đại DNA đích).
• Đọc kết quả- ống nghiệm chứa một phân tử liên kết DNA sợi
đôi sẽ phát huỳnh quang dưới ánh sáng tia cực tím (phát hiện
bằng mắt thường).
TB-LAMP như một xét nghiệm thay thế cho soi đờm: ước tính độ
nhạy và độ đặc hiệu
Tất cả các tiêu chuẩn tham chiếu
phân loại bệnh nhân là mắc
bệnh lao nếu có ít nhất một
mẫu đờm được xác nhận là M.
tuberculosis bằng xét nghiệm
đặc hiệu. Để được phân loại là
không bị lao, bệnh nhân phải
không có kết quả dương tính và
(i) ít nhất hai mẫu nuôi cấy âm
tính trên hai mẫu đờm khác
nhau (Tiêu chuẩn 1), (ii) ít nhất
hai mẫu nuôi cấy âm tính trên
cùng một mẫu đờm hoặc khác
nhau (Tiêu chuẩn 2), hoặc (iii) ít
nhất một mẫu nuôi cấy âm tính
(Tiêu chuẩn 3).
Các xét nghiệm chẩn đoán ban đầu để chẩn đoán bệnh lao mà không phát hiện
kháng thuốc: Khuếch đại đẳng nhiệt qua trung gian vòng lặp (TB-LAMP)
Xét nghiệm Xpert MTB/XDR: gen đích liên quan đến thuốc, vùng codon và trình
tự nucleotide xác định sự hiện diện của các biến thể liên quan đến kháng thuốc
Xét nghiệm Xpert MTB/XDR
• Xpert MTB/XDR được thiết kế để sử dụng như một xét nghiệm trên các mẫu bệnh
phẩm (đờm chưa qua xử lý hoặc cặn đờm) đã được phát hiện là dương tính với
MTBC
• Giới hạn phát hiện (LoD) đối với Mtb của Xpert MTB / XDR (136 cfu / mL trong đờm
chưa qua xử lý) tương tự như của Xpert MTB / RIF (112,6 cfu / mL), nhưng cao hơn
so với Xpert Ultra (15,6 cfu / mL).
• Các mẫu có ‘MTB vết ' sẽ dưới giới hạn phát hiện xét nghiệm MTB / XDR và không
được khuyến cáo xét nghiệm với xét nghiệm Xpert MTB / XDR.
• Xpert MTB /XDR cũng phát hiện cả vi khuẩn sống và chết.
• Độ nhạy gộp là 94,2% (CI 95%: 89,3–97,0%) và độ đặc hiệu gộp là
98,0% (CI 95%: 95,2–99,2%).
• Độ nhạy gộp là 93,1% (CI 95%: 88,0–96,1%) và độ đặc hiệu
gộp là 98,3% (CI 95%: 94,5–99,5%).
• Độ nhạy gộp là 98,0% (CI 95%: 74,2–99,9%) và độ đặc hiệu gộp là 99,7% (CI 95%:
83,5–100,0%).
• So với tiêu chuẩn tham chiếu của DST kiểu hình, độ nhạy gộp là 51,7% (CI 95%: 33,1–
69,8%).
• Độ nhạy gộp là 86,1% (CI 95%: 75,0–92,7%) và độ đặc hiệu gộp là 98,9% (CI
95%: 93,0–99,8%).
Khuyến cáo liên quan Xpert MTB/XDR
• Ở những người bị lao phổi đã được xác nhận về mặt vi khuẩn, có thể sử dụng NAAT tự
động có độ phức tạp thấp trên đờm để phát hiện ban đầu khả năng kháng isoniazid và
fluoroquinolones, thay vì DST kiểu hình dựa trên nuôi cấy. (Khuyến cáo có điều kiện; độ
chắc chắn vừa phải của bằng chứng về độ chính xác chẩn đoán)
• Ở những người bị lao phổi đã được xác nhận về mặt vi khuẩn và kháng rifampicin, có thể sử
dụng NAAT tự động có độ phức tạp thấp trên đờm để phát hiện ban đầu khả năng kháng
ethionamide, thay vì giải trình tự DNA của chất kích thích inhA. (Khuyến cáo có điều kiện;
độ chắc chắn rất thấp của bằng chứng về độ chính xác chẩn đoán)
• Ở những người bị lao phổi đã được xác nhận về mặt vi khuẩn và kháng rifampicin, có thể sử
dụng NAAT tự động có độ phức tạp thấp trên đờm để phát hiện ban đầu khả năng kháng
amikacin, thay vì DST kiểu hình dựa trên nuôi cấy (Khuyến cáo có điều kiện; độ chắc chắn
thấp của bằng chứng về độ chính xác chẩn đoán)
Nguyên lý xét nghiệm LPA
• công nghệ dải DNA lai ngược và bao gồm ba bước: Chiết xuất DNA từ nuôi cấy M.
tuberculosis phân lập hoặc trực tiếp từ mẫu bệnh phẩm của bệnh nhân, tiếp theo là
khuếch đại PCR ghép kênh và sau đó lai ngược liên kết amplicon (hoặc không) với
các đầu dò đột biến và chủng hoang dã
• Đột biến được phát hiện bởi:
1. sự liên kết của amplicon với các đầu dò nhắm vào các đột biến thường xảy ra
nhất (đầu dò MUT) hoặc
2. được suy ra bởi sự thiếu lai tạo (tức là thiếu liên kết) của amplicon với các đầu
dò WT tương ứng.
GLI 2018; Cập nhật hướng dẫn chẩn đoán, xét nghiệm nhanh chẩn đoán lao của TCYTTG (Module 3). 2021
Hiệu suất của ba xét nghiệm LPA để phát hiện kháng rifampicin và isoniazid với
DST dựa trên nuôi cấy kiểu hình làm tiêu chuẩn tham chiếu
LPA các thuốc lao hàng 1
Khuyến cáo
• Đối với những người có mẫu soi dương hoặc nuôi cấy, dương tính có thể
sử dụng LPA làm xét nghiệm ban đầu thay vì DST dựa trên nuôi cấy kiểu
hình để phát hiện kháng rifampicin và isoniazid. (Khuyến nghị có điều
kiện, độ chắc chắn vừa phải trong bằng chứng cho độ chính xác của xét
nghiệm)
Độ chính xác của GenoType MTBDRsl (phiên bản 1.0) đối với
fluoroquinolone và kháng SLID và XDR-TB, xét nghiệm gián tiếp và
trực tiếp (mẫu soi dương tính), tiêu chuẩn tham chiếu DST dựa trên
nuôi cấy
Các khuyến cáo
• Đối với những bệnh nhân được khẳng định MDR/RR-TB, có thể sử dụng
SL-LPA làm xét nghiệm ban đầu, thay vì DST dựa trên nuôi cấy kiểu hình,
để phát hiện khả năng kháng fluoroquinolone.
• Đối với những bệnh nhân có MDR/RR-TB được xác nhận, LPA2 có thể
được sử dụng làm xét nghiệm ban đầu, thay vì DST dựa trên nuôi cấy
kiểu hình, để phát hiện đề kháng với SLID.
NAAT dựa trên lai ngược có độ phức tạp cao để phát
hiện kháng pyrazinamide
• Nipro (Osaka, Nhật Bản) đã phát triển Genoscholar™ PZA-TB, một LPA với công nghệ
dựa trên lai ngược để phát hiện kháng pyrazinamide.
• So với MTBDRplus và MTBDRsl LPA, Genoscholar PZA-TB LPA không bao gồm các đầu
dò đột biến cụ thể vì đột biến kháng thuốc phổ biến rộng rãi trên toàn bộ gen pncA
mà không có đột biến chiếm ưu thế.
• Xét nghiệm PZA-TB genoscholar nhắm vào một mảnh ghép 700 cơ sở (bp) bao phủ
toàn bộ gen pncA và vùng khuyến khích cho đến nucleotide –18 của chủng tham
chiếu H37Rv loại hoang dã.
• DNA được chiết xuất từ nuôi cấy được khuếch
đại bằng mồi bằng PCR.
• Lai với các đầu dò oligonucleotide bổ sung
được liên kết trên một dải màng.
• Streptavidin được dán nhãn với phosphatase
kiềm được thêm vào
• một chất nền được thêm vào, và một phản
ứng enzyme dẫn đến các dải màu tím, được
diễn giải trực quan.
• Sự vắng mặt của liên kết thăm dò loại hoang
dã cho thấy sự hiện diện của một đột biến.
• Phiên bản đầu tiên chứa 47 đầu dò, bao phủ pncA và khung đọc mở.
• Phiên bản thứ hai chứa 48 đầu dò, ba trong số đó (pncA 16, 17 và 35) đại diện cho các đột biến
câm không liên quan đến kháng pyrazinamide: Gly60Gly (đầu dò 16), Ser65Ser (đầu dò 17) và
Thr142Thr (đầu dò 35).
• Độ nhạy trong bảy nghiên cứu này dao động từ 36% đến 100% và độ đặc hiệu
từ 96% đến 100%. Độ nhạy gộp là 81,2% (CI 95%: 75,4–85,8%) và độ đặc hiệu là
97,8% (CI 95%: 96,5–98,6%).
NAAT dựa trên lai ngược có độ phức tạp cao để phát
hiện kháng pyrazinamide
Kết quả không tương thích
Chẩn đoán lao
• Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện", nuôi cấy âm tính
– "MTB được phát hiện ", nuôi cấy âm tính
– Xpert Ultra "MTB phát hiện vết", nuôi cấy âm tính
• Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện", nuôi cấy dương tính
– Xét nghiệm WRD ít nhạy hơn nuôi cấy
WRD: Xét nghiệm chẩn đoán nhanh được TCYTTG khuyến cáo
Cập nhật hướng dẫn chẩn đoán, xét nghiệm nhanh chẩn đoán lao của TCYTTG – Hướng dẫn thực hành (Module 3). 2021
Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện", nuôi cấy
âm tính
• Nuôi cấy âm tính từ những người mắc bệnh lao phổi:

– bệnh nhân đang được điều trị lao (điều trị làm cho MTBC bất hoạt),
– vấn đề vận chuyển hoặc xử lý
– Ngoại nhiễm
– Khối lượng mẫu xét nghiệm không đầy đủ,
– một lỗi phòng thí nghiệm hoặc hành chính.
• Dương tính giả với WRD do xác trực khuẩn ở những bệnh nhân trước đây đã
được điều trị bệnh lao
Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện", nuôi cấy
âm tính
• Kết quả WRD phân tử và phán đoán lâm sàng nên được sử dụng để hướng dẫn
quyết định điều trị.
– bệnh lao có bằng chứng vi khuẩn của nếu không được điều trị gần đây bằng thuốc chống
lao.
• Người nhiễm HIV, trẻ em hoặc mẫu bệnh phẩm ngoài phổi: lợi ích của việc tăng
độ nhạy cảm (tức là dương tính thực sự) lớn hơn tác hại tiềm tàng của việc giảm
độ đặc hiệu (tức là dương tính giả).
• Người lớn không có nguy cơ nhiễm HIV: phụ thuộc vào việc người đó đã được
điều trị bệnh lao trước đó hay chưa (tức là dương tính giả).
Khuyến cáo về Xpert Ultra làm xét nghiệm ban đầu ở người lớn và trẻ em có
các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi
5. Ở trẻ em có các dấu hiệu và triệu chứng nghi lao phổi, cần sử dụng Xpert
Ultra làm xét nghiệm chẩn đoán ban đầu và phát hiện kháng rifampicin
ở đờm hoặc chọc hút mũi họng, thay vì soi/nuôi cấy và DST kiểu hình.
(Khuyến cáo mạnh mẽ, độ chắc chắn thấp của bằng chứng về độ chính
xác của xét nghiệm ở đờm; độ chắc chắn rất thấp của bằng chứng về độ
chính xác của xét nghiệm trong chọc hút mũi họng)
Kết quả không đồng nhất: Kháng Rifampicin (RIF)
• Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện, phát hiện kháng RIF"; RIF nhạy cảm
với DST kiểu hình
– Kết quả KSĐ kiểu hình nhạy cảm sai, đặc biệt là hệ thống MGIT
– Đột biến thầm lặng
– Xpert MTB / RIF khi kết quả phát hiện MTB là "rất thấp".
• Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện, không phát hiện kháng RIF"; Kháng
RIF bằng DST kiểu hình
– Kháng RIF phát sinh từ các đột biến bên ngoài gen rpoB được bao phủ bởi các
phương pháp phân tử
Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện, phát hiện kháng
RIF"; RIF nhạy cảm với DST kiểu hình
• Sử dụng kết quả WRD phân tử để hướng dẫn các quyết định điều trị trong khi chờ
xét nghiệm bổ sung
• Một số đột biến nhất định được biết là tạo ra kết quả không đồng nhất này, đặc
biệt là trong hệ thống MGITTM (tức là kết quả kiểu hình nhạy cảm giả).
– Bệnh nhân bị nhiễm các chủng mang những đột biến này thường thất bại trong điều trị bằng
phác đồ đầu tay dựa trên RIF
• Kết quả kháng RIF sai do đột biến im lặng: đây là những kết quả rất hiếm
• Kết quả kháng RIF sai khi Xpert MTB / RIF kết quả MTB được phát hiện là "rất
thấp": lặp lại Xpert; có thể thực hiện WRD trên mẫu nuôi cấy.
Ranh giới kháng ở đột biến rpoB
• Một quy tắc: "bất kỳ đột biến nào (không bao gồm
đột biến im lặng) được quan sát thấy trong vùng xác
định kháng rifampicin 81bp của gen rpoB đều được
biết hoặc giả định có liên quan đến kháng
rifampicin"
– Cần được điều trị bằng phác đồ MDR/RR-TB
• Quy tắc này đã được giới thiệu để giải quyết sự
nhầm lẫn xung quanh đột biến rpoB “ranh giới
kháng"
– ban đầu được định nghĩa là "tranh chấp" vì ranh giới này
có nhiều khả năng kiểm tra RIF-S bằng MGIT hơn so với LJ
Source: 2019 Massachusetts Medical Society
Một đột biến thầm lặng tại codon533 ở gen rpoB
Mathys V, et al. Int J Tuberc Lung Dis 16:1255–1257

Tỷ lệ hiện mắc và yếu tố
liên quan đến kháng
rifampicin dương tính giả
xét nghiệm Xpert MTB /
RIF ở Rwanda
Tỷ lệ hiện mắc và yếu
tố liên quan đến kháng
rifampicin dương tính
giả xét nghiệm Xpert
MTB / RIF ở Rwanda
Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện, không phát hiện
được kháng RIF"; Kháng RIF bằng DST kiểu hình
• Phác đồ điều trị nên được điều chỉnh dựa trên kết quả của DST kiểu hình
• Rất hiếm khi có kết quả WRD phân tử nhạy cảm với RIF giả, nhưng đã được
quan sát thấy ở 1–5% ca bệnh lao được xét nghiệm với xét nghiệm Xpert
MTB/RIF trong các vùng dịch tễ khác nhau. Các đột biến trong khu vực của
gen rpoB được lấy mẫu bởi các xét nghiệm Xpert MTB đã được chứng minh là
chiếm 95–99% khả năng kháng RIF. Phần còn lại của kháng RIF phát sinh từ các
đột biến bên ngoài vùng được lấy mẫu, tạo ra kết quả XPERT MTB của "kháng
RIF không được phát hiện".
Phát hiện bệnh lao kháng
thuốc bằng Xpert MTB /
RIF
ở Eswatini
Sanchez-Padilla E, et al N Engl J Med 2015

Tóm tắt - sự không đồng nhất giữa xét nghiệm kiểu hình và
xét nghiệm phân tử
• Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện", nuôi cấy âm tính
– Dương tính thực sự của bệnh lao, nuôi cấy dương tính giả
– Dương tính giả với WRD do trực khuẩn không khả thi ở những bệnh nhân trước đây đã được điều trị bệnh lao
• Kết quả WRD phân tử "MTB không được phát hiện", nuôi cấy dương tính
– Xét nghiệm WRD ít nhạy hơn nuôi cấy
• Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện, phát hiện kháng RIF"; RIF nhạy cảm với DST kiểu hình
– Kết quả kiểu hình nhạy cảm sai, đặc biệt là hệ thống MGIT
– Kết quả kháng RIF sai do đột biến Im lặng
– Kết quả kháng RIF sai Xpert MTB / RIF khi kết quả mtb được phát hiện là "rất thấp"
• Kết quả WRD phân tử "MTB được phát hiện, không phát hiện được kháng RIF"; Kháng RIF bằng
DST kiểu hình
– Kháng RIF phát sinh từ các đột biến bên ngoài gen rpoB được bao phủ bởi các phương pháp phân tử

Module 3 Diagnosis DRTB Update VIE

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

You might also like

Module 3 Diagnosis DRTB Update VIE

Uploaded by

Document Information

Original Title

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Module 3 Diagnosis DRTB Update VIE

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

Xét nghiệm chẩn

đoán lao nhanh

CHIANG Chen-Yuan MD,

GLI 2017, Chakravorty 2017

Dorman S.E. Lancet Infect Dis 2018

Dorman E. Lancet Infect Dis 2017

Dorman E. Lancet Infect Dis 2017

• Độ nhạy tổng thể trong 29

• Độ nhạy trong 18 nghiên

• Độ nhạy trong 18 nghiên

• Bộ công cụ phát hiện vi khuẩn lao Loopamp™

• Nuôi cấy âm tính từ những người mắc bệnh lao phổi:

Mathys V, et al. Int J Tuberc Lung Dis 16:1255–1257

Sanchez-Padilla E, et al N Engl J Med 2015

You might also like